基本信息
- 项目名称：
- 叶用芥菜 (Brassica juncea)和白菜型油菜 (B. rapa)之间体细胞杂交体的RAP
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 人工的细胞融合开始于20世纪50年代，60年代到70年代作为一门新兴的技术发展非常快，应用范围也极为广泛。细胞融合技术作为细胞工程的核心基础技术之一，已在农业、医药、环保等领域取得了开创性的研究成果，而且应用领域不断扩大。
- 详细介绍：
- 随机扩增多态性DNA (Random Amplified Polymorphism DNA- RAPD)是1990年由Wiliam和Welsh等人[3]利用PCR技术发展的检测DNA多态性的方法。RAPD分子标记建立在PCR基础之上，通过使用一系列具有10个碱基的单链随机引物，对基因组的全部DNA进行PCR扩增以检测多态性。RAPD的重复性是限制其应用的主要因素，影响其重复性的因素很多，如模板浓度及纯度、Taq酶、dNTP浓度、引物浓度、Mg2+的用量等。但是RAPD技术因其操作简便、反应迅速、成本低、通用性好、灵敏度高且不需预先了解基因组的相关分子和DNA用量少等优点而被广泛应用于药用植物种内或种间亲缘关系、种质资源分析、生物种群划分、基因定位、遗传图谱构建和遗传多样性方面的研究。
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 目的：检测叶用芥菜和野生型白菜型油菜杂交体的基因组，鉴定杂交体植株。 基本思路：利用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术筛选出最适引物，进而对杂交体扩增的基因组分析，鉴定杂交植株。
科学性、先进性及独特之处
- 随机扩增多态性DNA（RAPD）是1990年由Wiliam和Welsh等人利用PCR技术发展的检测DNA多态性的方法，本实验利用RAPD技术对叶用芥菜和野生型白菜型油菜的细胞杂交体的基因组检测。
应用价值和现实意义
- 培育融合亲本优良性状的杂合体，并利用分子标记技术检测其基因组，判断杂交体是否含有亲本的特异性基因，减轻杂交后代的筛选工作进而建立对杂交体的培育方向。
学术论文摘要
- 以叶用芥菜（Brassica juncea）、野生型白菜型油菜(B.rapa)及其体细胞杂交体为材料，用随机扩增多态性DNA (RAPD)技术进行基因组DNA多态性分析，共选用30个Operon10 bp随机引物扩增出DNA片段。通过PCR-RAPD扩增选出了3个（OPA4，OPA8，OPB8）适合鉴定体细胞杂交体的引物。这些引物扩增的杂交体条带中都有叶用芥菜和白菜型油菜的特征带，在少数杂交体中出现新增条带，表明这些植株均可能为体细胞杂交体。
获奖情况
- 无
鉴定结果
- 无
参考文献
- [1] 霍乃蕊，韩克光. 细胞融合技术的发展及应用[J]. 激光生物学报，2006，4:1-2. [2] 李志勇.细胞工程[M ].北京:科学出版社，2003: 3-21. [3] Williams J, Kubelik A, Livak K, et a1.DNA polymorphisms amplified by arbitrary primers are useful as markers[J].Nucleic Acids Research,1990,18: 6531-6535. [4] 胡立敏，陶兴林，侯栋，朱惠霞，张东琴. 花椰菜温敏型雄性不育系的RAPD标记. 生物技术通报. 2010，12: 1-2. [5] 周秀萍,杨长顺,李争鸣,阳大庆等.RAPD反应体系优化的研究[J]. 微生物学杂志.2010,1-4. [6] 李雪姣，张 耿，顾爱侠，轩淑欣，王彦华，赵建军.芸薹属作物EST-SNP的发掘与分析 [J]. 植物遗传资源学报. 2010，11: 772-776. [7] Gerdemann-knÖrck M, Nielen S, Tzscheetzsch C. Transfer of disease resistance within the genus Brassica through asymmetric somatic hybridization. Euphytica. 1995, 85: 247-253 [8] Chèvreá AM, Eberá F, Barret P, Dupuyá P, Brace J. Identification of the different Brassica nigra chromosomes from both sets of B. oleracea-B. nigra and B. napus-B. nigra addition lines with a special emphasis on chromosome transmission and self-incompatibility. Theor Appl Genet. 1997, 95: 1104-1111.
同类课题研究水平概述
- 无
