主办单位: 共青团中央   中国科协   教育部   中国社会科学院   全国学联  

承办单位: 贵州大学     

基本信息

项目名称:
食管癌细胞ECa109S100A4表达干预的生物学意义
小类:
生命科学
简介:
应用细胞培养、爬片技术、免疫细胞化学方法检测S100A4 RNA干扰前后该蛋白的表达,台盼蓝细胞计数研究细胞增殖变化,应用划痕实验检验该细胞增殖、迁移及侵袭能力的改变。探讨S100A4蛋白在食管癌ECA-109细胞中的表达特点及RNA干扰沉默基因表达后,肿瘤的生长,增殖及迁移的改变。
详细介绍:
食管癌是我国高发的恶性肿瘤之一,其发病机制不明确,患者往往就诊时即为罹患肿瘤晚期,手术损伤大且患者生存质量差,目前尚缺乏准确有效的早期诊断方法,而对于不能接受手术的晚期患者亦没有理想的分子/基因治疗手段,因而导致食管癌高死亡率居高不下。本研究为深入了解食管癌发展和侵袭的关键分子、筛选早期诊断和晚期分子治疗的有效指标提供有价值的实验依据。探讨S100A4蛋白在食管癌ECA-109细胞中的表达特点及RNA干扰沉默基因表达后,肿瘤的生长,增殖及迁移的改变。 基本思路:应用细胞培养、爬片技术、免疫细胞化学方法检测S100A4 RNA干扰前后该蛋白的表达,台盼蓝细胞计数研究细胞增殖变化,应用划痕实验检验该细胞增殖、迁移及侵袭能力的改变。

作品专业信息

撰写目的和基本思路

目的:探讨S100A4蛋白在食管癌ECA-109细胞中的表达特点及RNA干扰沉默基因表达后,肿瘤的生长,增殖及迁移的改变。 基本思路:应用细胞培养、爬片技术、免疫细胞化学方法检测S100A4 RNA干扰前后该蛋白的表达,台盼蓝细胞计数研究细胞增殖变化,应用划痕实验检验该细胞增殖、迁移及侵袭能力的改变。

科学性、先进性及独特之处

本研究食管癌细胞系ECA-109从中科院上海细胞库引进;免疫细胞化学采用ABC法,S100A4 siRNA试剂购自上海吉玛生物公司。实验中设立对照组。采用细胞培养、爬片技术、、免疫细胞化学、台盼蓝细胞计数、划痕实验等多种技术。作品首次证实了S100A4在食管癌ECA-109细胞中的表达与其生长增殖无关,但划痕实验显示其与细胞的迁移与侵袭能力关系密切。

应用价值和现实意义

食管癌是我国高发的恶性肿瘤之一,其发病机制不明确,患者往往就诊时即为罹患肿瘤晚期,手术损伤大且患者生存质量差,目前尚缺乏准确有效的早期诊断方法,而对于不能接受手术的晚期患者亦没有理想的分子/基因治疗手段,因而导致食管癌高死亡率居高不下。本研究为深入了解食管癌发展和侵袭的关键分子、筛选早期诊断和晚期分子治疗的有效指标提供有价值的实验依据。

学术论文摘要

【摘要】 目的 探讨S100A4蛋白在食管癌ECA-109细胞中的表达特点及RNA干扰沉默该基因表达后,肿瘤细胞生长、增殖及迁移的改变。 方法 应用细胞培养、爬片技术、免疫细胞化学方法检测S100A4 RNA干扰前后该蛋白的表达,台盼蓝细胞计数研究细胞增殖变化,应用划痕实验检验该细胞增殖、迁移及侵袭能力的改变。 结果 RNA干扰3天后,S100A4在食管癌ECA-109细胞中的表达明显下调,其生长与增殖未受影响,但划痕显示干扰后该细胞迁移与侵袭能力下降。 关键词 食管癌ECA-109细胞;S100A4;RNA干扰;迁移与侵袭

获奖情况

大连医科大学课外科技作品大赛校级三等奖

鉴定结果

参考文献

细胞培养技术、免疫细胞化学技术、RNA干扰技术、划痕实验 Ma X, et al. Small interfering RNA-directed knockdown of S100A4 decreases proliferation and invasiveness of osteosarcoma cells. Cancer Lett 299:171-81, 2010.

同类课题研究水平概述

食管癌是我国最常见的癌症之一,目前其临床治疗效果还相当有限,5年生存率不到15%.我国研究者对食管癌进行了长期的研究并取得显著成绩,提出环境因素是食管癌病因的假说.然而,同样暴露于相似环境因素的人群,却只有少数人发生食管癌,提示个人的遗传因素对食管癌发生可能有重要作用.目前普遍认为食管癌是多因素作用,多基因参与,多阶段发展的疾病,然而其发生和发展的确切机制仍未阐明.已有许多研究探讨了食管癌中癌基因和抑癌基因的改变[1],有人用cDNA芯片分析食管癌变不同阶段的基因表达谱[2],这些研究有助于认识食管癌的生物学性质以及发生和发展过程中的分子生物学的改变.最近有人对我国北方食管癌家族聚集性进行研究,认为存在高度外显的易感基因[3],另一研究也提示林县食管癌符合孟德尔常染色体隐性遗传[4].然而,至今尚无直接证据证明确实存在高度外显的食管癌易感基因.我们设想,即使存在这种高度特异的易感基因,也可能只局限于一些家族性食管癌,正如BRCA1/2与乳腺癌一样;而大多数散发性食管癌更可能是一系列多态性相关基因之间以及这些基因与环境之间相互作用引起的.
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