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承办单位: 贵州大学     

基本信息

项目名称:
三叶木通基因组DNA提取方法的研究
小类:
生命科学
简介:
本实验用CTAB法和SDS法提取木通科木通属三叶木通的基因组DNA,并对其进行质量检测,获取高质量的DNA。结果表明两种方法都能提取到DNA,电泳条带清晰。CTAB法提取的DNA纯度高,完整性好。SDS法提取的DNA量多,但质量不高。
详细介绍:
目的:用CTAB法和SDS法提取木通科木通属三叶木通的基因组DNA,并对其进行质量检测,获取高质量的DNA。方法:采用CTAB法和SDS法提取三叶木通嫩叶中的DNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法测其质量。结果:两种方法都能提取到DNA,电泳条带清晰。CTAB法提取的DNA纯度高,完整性好。SDS法提取的DNA量多,但质量不高。结论:两种方法都可以提取到三叶木通的DNA...(查看更多)

作品专业信息

撰写目的和基本思路

目前,药用植物DNA的提取有多种方法:高盐低pH法、SDS法、CTAB法等,但效果不一。不同植物材料含有不同种类和数量的次生代谢产物,要获取高质量的DNA,需要有针对性地选择不同的提取方法。通过比较CTAB法和SDS法提取的三叶木通DNA的质量,寻求一种最适于三叶木通的高质量DNA提取方法,为今后进一步的三叶木通种质资源DNA分子标记技术研究奠定基础。

科学性、先进性及独特之处

从三叶木通叶片中提取高质量的基因组DNA,是DNA分子标记技术成功应用的前提条件。本文通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法比较CTAB法和SDS法提取三叶木通DNA的质量,建立了最适于三叶木通的高质量DNA提取方法。

应用价值和现实意义

通过对CTAB法和SDS法提取的DNA质量的比较,建立适于AFLP反应的高质量三叶木通基因组DNA提取方法,为进一步DNA分子标记技术成功应用,提高其产量和质量奠定基础,对缓解药材紧张、保证药材质量、确保临床疗效有重大意义。

学术论文摘要

目前,药用植物DNA的提取有多种方法:高盐低pH法、SDS法、CTAB法等,但效果不一。不同植物材料含有不同种类和数量的次生代谢产物,要获取高质量的DNA,需要有针对性地选择不同的提取方法。CTAB是一种去污剂,既能裂解细胞,又能有效沉淀多糖。它能与核酸形成复合物,在高盐溶液中是可溶的,当降低盐浓度到一定程度时,从溶液中沉淀,通过离心就可将核酸的复合物同蛋白质、多糖物质分开...(查看更多)

获奖情况

鉴定结果

SDS法产量高,但纯度低、电泳拖尾现象严重,说明所得的样品中含有杂蛋白或苯酚。采用CTAB法虽然产量低,但纯度高,未出现拖尾现象。CTAB法提取三叶木通总DNA要优于SDS法。

参考文献

[1]刘占朝.三叶木通研究进展综述[J].河南林业,2005,25(1):20-22. [2] 庞发虎,赵旗峰,张俊民,等.一种值得开发的野生果树——三叶木通[J].山西果树.2002,7(3)25. [3] 陈莉等.几种重要DNA提取方法比较研究,广西植物志,2007,27(1),137-139; [4] EDWARDS K,JOHNSTONE C,THOMPSON C.A s...(查看更多)

同类课题研究水平概述

1.化学研究 迄今为止,国内外学者从木通属植物中已经分离得到了69个三萜和三萜皂苷类化合物。果实中含有由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、木糖和半乳糖组成的多糖。蒋立科,刘沛伦等分别对白木通和三叶木通成熟果实中的氨基酸进行测定,将结果表明,2种木通氨基酸种类相同,共含有17种,其中天冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、亮氨酸、精氨酸和赖氨酸含量较高。 2.栽培技术研究 2.1种子繁殖:种子先用碱水...(查看更多)
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