基本信息
- 项目名称：
- 南蛇藤原生质体培养及植株再生
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 本实验以南蛇藤愈伤组织为材料，进行原生质体的分离、纯化和培养，获得了愈伤组织并分化成苗，建立了较完善的技术体系，为进一步改良与扩繁南蛇藤奠定了基础。植物原生质体是被去掉纤维素外壁的具有生活力的裸露细胞，它能直接摄取外源DNA、细胞器等，因此是研究细胞生理现象的理想材料，同时也是遗传转化的理想受体。在原生质体培养中可通过遗传操作和突变体的筛选对品种进行改良，创造优异品种。
- 详细介绍：
- 以4℃低温暗处理24h的南蛇藤愈伤组织为分离原生质体的原材料。用MS培养基进行液体浅层静置、固液双层以及琼脂糖包埋培养原生质体，获得再生愈伤组织并分化成苗，建立了原生质体培养体系。结果表明，低温暗处理利于高产率高质量原生质体的获得；0.5%纤维素酶+0.5%果胶酶+5mmol/L MES为酶的最佳配方；静置12h+振荡0.5h为最佳酶解方式；液体浅层静置培养取得了较好的原生质体培养效果；MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.1 mg/L为最佳分化培养基；1/2MS+NAA 0.1mg/L为最佳生根培养基。南蛇藤(Celastrus orbiculatus Thunb．)为卫矛科（Celastraceae）南蛇藤属（Celastrus）植物[3] ，又名过山风、黄藤、降龙草等。主要分布于我国的东北、华北、西北、华东、西南、广东及两湖地区，朝鲜和日本亦有分布。清代《植物名实图考》记载南蛇藤藤茎、根、叶、果实、种子均可入药，现代药学记载南蛇藤有祛风、除湿、活血、解毒、消肿等功效，主要用于治疗筋骨疼痛、腰腿痛、风湿性关节炎、闭经、痢疾、跌打损伤、痈肿疮疡等病症，具有较高的药用价值。本实验以南蛇藤愈伤组织为材料，进行原生质体的分离、纯化和培养，获得了愈伤组织并分化成苗，建立了较完善的技术体系，为进一步改良与扩繁南蛇藤奠定了基础。
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作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 原生质体融合, 植株再生频率低以及体细胞杂种育性低等问题,严重制约着原生质体培育技术在育种中的应用。本实验以南蛇藤愈伤组织为材料，进行原生质体的分离、纯化和培养，获得了愈伤组织并分化成苗，建立了较完善的技术体系，以期通过对南蛇藤原生质体的培养以及植株再生的研究对其他的药用植物开发利用和推广种植提供详实的实验数据及理论依据。
科学性、先进性及独特之处
- 南蛇藤是细胞生理现象的理想材料，同时也是遗传转化的理想受体。在原生质体培养中可通过遗传操作和突变体的筛选对品种进行改良，创造优异品种。自1960年Cooking开创了植物原生质体培养的研究纪元以来，相继出现了很多关于植物原生质体培养的相关报道，而关于卫矛科不同属植物的原生质体培养以及植株再生的相关研究未见报道。所以对其研究将有利于我们进一步对南蛇藤进行改良、驯化，以充分开发其药用价值。
应用价值和现实意义
- 南蛇藤藤茎、根、叶、果实、种子均可入药，现代药学记载，南蛇藤有祛风、除湿、活血、解毒、消肿等功效，具有较高的药用价值，对开发天然药物和扩大天然药物的种植有深远的意义。本研究选用的南蛇藤幼茎, 具有较高细胞分裂和形态分化能力的组织, 诱导愈伤组织及建立悬浮细胞系, 仍保持了较高的细胞分裂和形态分化潜力, 分离出的原生质体经培养可持续分裂, 原生质体形成愈伤组织后很快分化出不定芽。
学术论文摘要
- 清代《植物名实图考》记载南蛇藤藤茎、根、叶、果实、种子均可入药，现代药学记载，南蛇藤有祛风、除湿、活血、解毒、消肿等功效，主要用于治疗筋骨疼痛、腰腿痛、风湿性关节炎、闭经、痢疾、跌打损伤、痈肿疮疡等病症，具有较高的药用价值。本实验以南蛇藤愈伤组织为材料，进行原生质体的分离、纯化和培养，获得了愈伤组织并分化成苗，建立了较完善的技术体系，为进一步改良与扩繁南蛇藤奠定了基础。对南蛇藤的改良、训化有重要的参考价值，对开发利用其药用价值有广阔的前景。
获奖情况
- 2010年4月在陇东学院第十届“挑战杯”大学生课外学术科技作品竞赛中获得二等奖
鉴定结果
- 该论文选题合理，研究内容全面，文章写作规范，结构合理，分析结果全面、正确，讨论详细。 2010年4月在陇东学院第十届“挑战杯”大学生课外学术科技作品竞赛中获得二等奖
参考文献
- [1] 刘庆昌,吴国良.植物组织培养[M].北京:中国农业大学出版社,2003:163-164. [2] 李志勇.细胞工程[M].北京:科学出版社,2003:75-76. [3] 涂永强,吴大刚.南蛇藤倍半萜成分研究[J].化学学报,1991,(10):1014-1017. [4] 赵新先,赵素兰.原色中草药图集[M].广州:广州世界图书出版公司,2003:176-177. [5] 孙敬三,朱至清.植物细胞工程实验技术[M].北京:化学工业出版社,2006:51-59. [6] 薛庆善.体外培养的原理与技术[M].北京:科学出版社,2001:1103-1117. [7] 孙勇如,安锡培等.植物原生质体培养[M]北京:科学出版社,1991:56-71. [8] 李浚明.植物组织培养教程[M].北京:北京农业大学出版社,1991:245-270. [9] 李春喜,姜丽娜,邵云,等.生物统计学[M].北京:科学出版社,2007:91-12. [10] 刘庆昌,吴国良.植物组织培养[M].北京:中国农业大学出版社,2003:177-178. [11] 赖钟雄,陈振光.龙眼胚性培养细胞原生质体分离和纯化[J].农业生物技术学报,2002,10(4):347-351. [12] 周维燕.植物细胞工程原理与技术[M].北京:中国农业大学出版社,2001:170-171. [13] R.d.Shillito.J.Paszkowskil and L.Potrykus Agarose planting and a bead type cuiture technipue enable and stimulate development of protoplant-derived colonies in a number of plant species[J].Plant Cell Report,1983,2:244-247. [14] 周颂东.播娘蒿原生质体培养研究[J].四川师范学院学报,2001,22(3):226-229. [15] 陈世昌.植物组织培养[M].重庆:重庆大学出版社,2006:65-66.
同类课题研究水平概述
- 植物原生质体是被去掉纤维素外壁的具有生活力的裸露细胞，它能直接摄取外源DNA、细胞器等，因此是研究细胞生理现象的理想材料，同时也是遗传转化的理想受体。在原生质体培养中可通过遗传操作和突变体的筛选对品种进行改良，创造优异品种。自1960年Cooking开创了植物原生质体培养的研究纪元以来，相继出现了很多关于植物原生质体培养的相关报道，而关于卫矛科不同属植物的原生质体培养以及植株再生的相关研究未见报道。所以对其研究将有利于我们进一步对南蛇藤进行改良、驯化，以充分开发其药用价值。
