基本信息
- 项目名称：
- 叶酸对大鼠胎盘发育中Bcl-2表达的影响
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 叶酸预防出生缺陷的机制及安全性研究成为热点。胎盘发育状态直接维系着胎儿的正常发育，Bcl-2是细胞凋亡的重要调节因子。本研究观察叶酸对胎盘发育的影响及Bcl-2在胎盘组织中的表达情况，从细胞水平探讨叶酸对发育中胎盘细胞的作用及机制，为叶酸预防出生缺陷的科学性及安全性提供依据。本实验将SD受孕大鼠灌服叶酸和生理盐水，取胎盘制备组织切片、染色，观察胎盘形态结构及Bcl-2的表达情况。
- 详细介绍：
- 叶酸作为参与细胞核酸合成的维生素，临床以往主要用于治疗贫血。自上世纪90年代始，叶酸用于预防胎儿出生缺陷，目前国内孕妇围孕期叶酸补充已基本普及。叶酸预防出生缺陷的机制及安全性研究成为热点。胎盘是为胎儿提供营养的特有器官，其发育状态直接维系着胎儿的正常发育。已知Bcl-2是细胞凋亡的重要调节因子，它通过抑制凋亡而达到增殖与凋亡的平衡，进而维持组织的完整性。关于叶酸与发育中胎盘Bcl-2表达关系的研究尚未见报道。本研究观察叶酸对胎盘发育的影响及Bcl-2在胎盘组织中的表达情况，从细胞水平探讨叶酸对发育中胎盘细胞的作用及机制，为叶酸预防出生缺陷的科学性及安全性提供依据。SD受孕大鼠随机分为四组:大、中、小剂量叶酸组，对照组，分别给予叶酸（2mg/kg/d、1mg/kg/d、0.5mg/kg/d）或等容生理盐水灌胃。孕13.5天各组大鼠处死，取胎盘制备组织切片，行HE和SP免疫细胞化学染色，观察胎盘形态结构及Bcl-2的表达情况。结果，各叶酸组大鼠胎盘组织结构与对照组比较无明显改变；大、中、小剂量叶酸组Bcl-2的阳性表达较对照组均显著增高（P<0.01）。上述结果提示，给予受孕大鼠灌服2mg/kg/d、1mg/kg/d、0.5mg/kg/d剂量叶酸，可增强胎盘组织中凋亡抑制基因Bcl-2的表达，进而可能抑制细胞凋亡，维持胎盘正常发育。
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作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 观察叶酸对SD大鼠胎盘中凋亡因子Bcl-2表达的影响，探讨叶酸对胎盘发育的作用及其可能机制，为临床孕妇科学、合理的补充叶酸提供理论依据和实验资料。本研究给予受孕大鼠叶酸，以受孕13.5d胎盘中Bcl-2的阳性细胞数为观察指标，从细胞水平探讨叶酸对发生过程中胎盘细胞凋亡的作用及机制。
科学性、先进性及独特之处
- 临床应用叶酸以预防神经管畸形等出生缺陷，但其作用机制不明。Bcl-2是细胞凋亡过程中的关键性调节因子，可通过抑制凋亡而维持胎盘组织的完整性，胎盘细胞Bcl-2的表达与胎盘生长发育密切相关。关于叶酸影响Bcl-2的表达与胎盘细胞发生关系的研究尚属首次。
应用价值和现实意义
- 本研究选择妊娠期特有的器官胎盘作为研究对象，因为胎儿的生长发育离不开胎盘的营养。凋亡调节因子Bcl-2可通过抑制凋亡而维持组织的完整性。本研究通过观察叶酸对胎盘发育及Bcl-2在胎盘组织中表达的影响，探讨叶酸对胎盘组织细胞增殖的影响，为临床服用叶酸的时间，剂量及安全性提供参考，为优生优育、提高出生人口素质提供科学理论依据。
学术论文摘要
- 目的 通过给予受孕大鼠灌服不同剂量叶酸，观察凋亡抑制基因Bcl-2在胎鼠胎盘组织中的表达情况，探讨叶酸对处于胚胎发育时期胎盘的影响，为临床服用叶酸预防出生缺陷提供实验依据。 方法 雌性成年SD大鼠随机分为四组：对照组、大、中、小剂量叶酸组。各组动物受孕后，实验组分别灌胃给予大、中、小剂量叶酸，对照组灌服等量生理盐水。ED13.5天各组大鼠断椎处死，取胎盘组织，常规制备组织切片，进行HE染色和SP免疫细胞化学染色，观察胎盘一般形态结构及Bcl-2的表达情况。 结果 大、中、小叶酸组大鼠胎盘组织结构与对照组比较无明显变化。大、中、小剂量叶酸组大鼠胎盘组织中Bcl-2的阳性表达较对照组均有增高，差异有统计学意义（P<0.01）。 结论 给予受孕大鼠灌服不同剂量叶酸，可增强胎鼠胎盘组织中凋亡抑制基因Bcl-2的表达，进而可能抑制细胞凋亡，维持胎盘正常发育。
获奖情况
- 2011年获得承德医学院大学生课外学术竞赛一等奖
鉴定结果
- 情况属实,学生独立完成
参考文献
- 叶酸对神经系统畸形的预防作用及机制研究广泛开展，但关于胎盘细胞中Bcl-2表达作用的研究未见报道。该实验应用免疫组化技术显示Bcl-2阳性细胞，具有特异性强、敏感度高的特点。 [1]农正祥，陈真燕 2种叶酸检测与妊中期孕妇中关系的分析[J]中外医疗 2010.No.4 58-60 [2]张淑敏 叶酸与妊娠 [J]继续医学教育2006，Vol.20.No.34:62 [3].李东志 林其德 细胞凋亡与胎盘 [J]免疫学杂志 1999年2期15卷 [4]Stephen C , Smit h P , Baker N. Placental apoptosis is increased in post - term pregnancies. British [J] Obstet rics Gynecology , 1999 , 106(8) :861 – 862.
同类课题研究水平概述
- 叶酸作为预防出生缺陷的药物逐渐成为研究热点。以往临床主要使用叶酸治疗贫血，自20世纪90年代以来，国内外主要将叶酸作为预防神经管畸形、先天性心脏病等出生缺陷的首选药物。文献报道，孕早期补充叶酸可使神经管畸形的发病率降低50%～70%，先天性心脏病发病率降低35.5%。关于叶酸对胎盘细胞发生影响的研究发现，叶酸的体内活性形式四氢叶酸是一碳单位转移酶的辅酶，主要参与胎盘细胞DNA和RNA的合成，与其生长、分化、增殖等生物活动密切相关。B cl-2 是1984 年由Tsujimoto等从14 号与18 号染色体易位的滤泡性淋巴瘤中分离出的一种原癌基因。已知B cl-2 可控制核内外物质的运输、抑制Ca2+ 的释放或阻断细胞内过氧化物的堆积而抑制细胞的凋亡。因此近年来Bcl-2作为一项评估细胞凋亡的指标广泛用于组织细胞凋亡的观察。胚胎细胞Bcl-2的表达对细胞增殖与器官发生、器官功能的建立以及干细胞的分化发育密切相关。 Kim YI等研究发现叶酸预防消化道肿瘤发生的机制为维持正常的DNA甲基化状态以及DNA前体的稳定，叶酸水平降低可致DNA不稳定和链断裂，但其是否在胎盘等增殖快的细胞有类似作用尚无明确报道。2008年有文献报道，孕晚期孕妇血液叶酸清除率较正常人高100% 。由于孕妇对叶酸的摄入、排泄、利用增加,极易出现叶酸缺乏, 叶酸的代谢异常可直接导致胎盘的发育障碍，从而影响胎儿组织分化、生长发育。有人提出叶酸缺乏可通过降低DNA甲基化水平来干扰胚胎代谢和发育的假设。已有实验证明叶酸缺乏孕鼠子代脑组织DNA甲基化水平降低。而有关叶酸与Bcl-2表达的关系目前国内外尚无报道。 本实验首次探讨了叶酸对SD大鼠胎盘Bcl-2表达的影响，为临床服用叶酸的时间及安全性提供参考，也为预防流产、早产等妊娠相关疾病提供新思路。
