基本信息
- 项目名称：
- 电针对不同血压水平大鼠的镇痛效应观察
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 临床发现，疼痛与血压异常在同一个体可同时/相继发生，血压影响疼痛性疾病的防治，因此有必要针对血压异常个体的疼痛防治开展研究工作，以推进疼痛治疗的临床疗效。本课题主要以不同血压水平福氏佐剂致大鼠慢性疼痛模型为研究对象，在检测正常血压、高血压、低血压疼痛模型大鼠痛阈的基础上进行电针干预，观察电针治疗不同血压水平疼痛的疗效，从而探讨机体不同血压水平对针刺镇痛疗效的影响。
- 详细介绍：
- 据不完全统计，浙江省疼痛的发病率大约为３５％-４５％，老年人的发病率较高，约为７５％-９０％；血压异常发病率高达40%，严重影响了人们的生活质量和经济建设。临床发现，疼痛与血压异常在同一个体可同时/相继发生，血压影响疼痛性疾病的防治，因此有必要针对血压异常个体的疼痛防治开展研究工作，以推进疼痛治疗的临床疗效。国内外的针灸疗法对疼痛和血压异常个体均有明确的良性调整作用，但是针灸治疗血压异常性疼痛的疗效缺乏证据。本课题主要以不同血压水平福氏佐剂致大鼠慢性疼痛模型为研究对象，在检测正常血压、高血压、低血压疼痛模型大鼠痛阈的基础上进行电针干预，观察电针治疗不同血压水平疼痛的疗效，从而探讨机体不同血压水平对针刺镇痛疗效的影响。研究成果将对针灸临床有理论指导价值，将促进浙江省血压异常性疼痛治疗水平的提高，补充和完善针灸治疗疾病的种类，有助于推广中医针灸治疗。 (一)实验材料 1．实验动物 健康wistar大鼠40只，体重180-200g，SPF级，购自上海市西普尔—必凯实验动物有限公司，由浙江中医药大学动物实验中心饲养； 健康SHR大鼠 16只，体重180-200g，SPF级，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，由浙江中医药大学动物实验中心饲养。 2．主要实验试剂 复方降压片、生理盐水、福氏完全佐剂、75％医用酒精。 3．主要仪器设备 电子称重仪、不锈钢大鼠笼、FA-2004型电子分析天平、电热恒温鼓风干燥箱、纯水机、无创血压测量仪、机械刺激缩足痛阈测量仪、电针治疗仪、针灸针、手套、注射器、16号灌胃针 。 （二）实验方法与步骤 1．实验动物及分组 成年雄性Wistar大鼠30只和成年雄性自发性高血压大鼠（SHR大鼠）12只，体重160~180 g,由浙江中医药大学动物实验中心提供。饲养环境为12 h昼夜节律变换,室温控制在18~24℃,湿度控制在50%~70%,大鼠自由饮食,待适应环境5 d后用于实验。所有实验动物的处理符合国际疼痛研究会制定的准则。 将30只成年雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、正常血压A组（正常血压AA模型+EA组）、正常血压B组（正常血压AA模型组）、低血压A组（低血压AA模型+EA组）和低血压B组（低血压AA模型组）；将12只SHR大鼠随机分为高血压A组（高血压AA模型+EA组）、高血压B组（高血压AA模型组）。每组6只； 2．制作低血压大鼠模型 对低血压A组和低血压B组采用复方降压片灌胃造模。将复方降压片与生理盐水按20ml/片混合，配成悬浊液，以16ml/kg标准对大鼠进行灌胃，早晚各一次，连续灌胃两周后测量体重、血压，血压≦90mmHg的大鼠进入实验。治疗期间也持续灌胃，早晚各一次； 3．外周佐剂性慢性炎症痛模型制作 建立低血压模型后，将福氏完全佐剂（sigma）乳剂0.1ml（0.5mg/ml）注入6组大鼠左侧足跖皮下，使其局部产生红、肿、痛等炎性反应，注射建立慢性炎症痛模型（AA模型）。从而建立了正常血压复合AA模型（正常血压AA模型）、低血压复合AA模型（低血压AA模型）和高血压复合AA模型（高血压AA模型）； 4．取穴 取穴参照《中国兽医针灸学》[9]的方法取穴,并参照人体有关穴位,以动物比较学方法定位,用0•25 mm×13 mm的毫针针刺(正常血压A组、低血压A组和高血压A组均使用此规格针具)。取左侧“足三里”穴和任意临近部位； 5．电针治疗参数 给正常血压A组、低血压A组和高血压A组进行电针治疗,刺激参数如下：电针刺激左侧“足三里”穴和一临近部位，疏密波(2/100 Hz)，强度依次为1-2-3 mA,每10 min递增1次,持续30 min。每天一次，共十天； 6．血压检测 于造血压模型前后及治疗后24h采用无创血压测量仪检测各组大鼠的血压变化，以确保实验期间血压维持在一定水平； 7．电针镇痛效应检测 于造AA模型前后、治疗前以及治疗后24h采用机械刺激缩足阈(paw withdrawal me-chanical threshold, PWMT)检测各组大鼠的痛阈变化，以观察电针治疗血压复合慢性炎症痛大鼠的镇痛效应； （三） 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件处理。统计数据描述用均数±标准差（ ±S）表示；进行单因素方差分析（One-Way A NOVA），组间两两比较， P<0•05作为差异显著性标准，表达差异有统计学意义。方差齐性时用LSD检验，方差不齐时用Dunnett –t检验。 （四）项目实施基础 本校有设施完备的动物实验中心，提供清洁级实验大鼠和全封闭清洁级实验环境。而第三临床医学院拥有针灸神经生物学重点实验室，拥有分子生物实验区、免疫生化实验区、病理形态实验区、神经行为功能检测区及相关仪器设备，并已具备以下实验设备：大鼠测痛仪、酶标仪、切片机、包埋机、显微镜、图像分析系统、高速/低速冷冻离心机、电泳系统、半干转印槽、凝胶成像分析系统、紫外交联仪、暗箱系统、低温冰箱等。两方面都能够提供本项目开展所需的仪器设备和场地需要，保证项目顺利完成。 动物实验中心工作人员以及实验室人员拥有熟练的操作技术，可从理论与技术上给予该项目有力的支持，从而确保实验的完成。 指导老师自参加工作以来，一直从事针刺镇痛效应基础研究，研究方向为针刺镇痛与免疫调节的相关性研究。该基金项目“电针对不同血压水平大鼠的镇痛效应观察”拟说明机体不同血压水平影响针刺镇痛疗效，与指导老师的研究方向相同。而且指导老师工作认真负责，进一步保证了该项目的顺利完成。 本课题组成员具有强烈的求知欲、刻苦的钻研精神，严谨的工作作风以及良好的团队协作精神。在实验室人员以及导师的指导下，能够熟练掌握实验技术，合作完成该项目。 良好的工作条件、优秀的指导老师和一支团结进取的团队是保证本项目顺利完成的最大优势。同时该项目本身又具备了独有的特色与创新之处。 （五）结论 该项目研究结果表明持续电针左侧“足三里”穴10天，对于正常血压水平下、低血压水平下和高血压水平下的疼痛均具有明显的镇痛效应。本研究还发现不同血压水平下电针镇痛效应具有差异性。在低血压水平下，电针的镇痛效应最强；其次是高血压水平下；而正常血压水平下电针的镇痛效应相对一般。这也提示了机体不同血压水平影响电针镇痛效应，低血压水平可能更有助于电针镇痛效应的发挥。可见,电针镇痛疗法在临床上可以根据病人的血压水平再进行进一步的优化改进。而血压水平差异影响电针镇痛效应的机制也有待于进一步的研究。 此外，本研究还得出高血压水平下机体自身对疼痛的缓解能力较正常血压水平和低血压水平强，这也提示了高血压水平可能更有助于机体自身对疼痛的缓解。这也为疼痛临床分析提供了一个很好的理论参考依据。而此方面的机制则有待于进一步的研究。 综上所述，血压异常性疼痛的针灸治疗研究有利于针灸临床疗效的提高，也将促进针刺镇痛基础理论研究的深入开展和针灸疗法的推广应用。而随着针灸疗法的日益普及，这方面的研究也将越来越受到人们的重视。
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作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 本作品主要以不同血压水平福氏完全佐剂致大鼠慢性疼痛模型为研究对象，在检测正常血压、高血压、低血压疼痛模型大鼠痛阈的基础上进行电针干预，观察电针治疗不同血压水平疼痛的疗效，探讨机体不同血压水平对针刺镇痛疗效的影响。从而对针灸临床进行理论指导，促进浙江省血压异常性疼痛治疗水平的提高，促进针刺镇痛基础理论研究的深入开展和针灸疗法的推广应用。
科学性、先进性及独特之处
- 该作品通过观察电针疗法对正常血压水平、高血压水平和低血压水平慢性疼痛大鼠痛阈的干预，说明不同血压水平电针镇痛效应的差别，推动针灸疗法对不同血压水平慢性疼痛的治疗，并提高其临床疗效。 该作品的特色之处在于：首次采用福氏佐剂致慢性疼痛-血压复合模型对照研究针刺镇痛问题。该作品的创新之处在于：本作品结合国内外研究现状，针对血压-疼痛相关的研究，首次进行异常血压水平针刺镇痛效应探讨。
应用价值和现实意义
- 该作品能通过说明机体不同血压水平对针刺镇痛疗效的影响，推动针灸疗法对不同血压水平疼痛性疾病的治疗，并提高其临床疗效，促进针刺镇痛基础理论研究的深入开展和针灸疗法的推广应用，从而开拓针灸治疗疾病的市场，间接推动针灸行业的盈利。
学术论文摘要
- [摘要] 目的：观察不同血压水平下电针镇痛的效应差异。方法：将成年雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、正常血压A组、正常血压B组、低血压A组和低血压B组；成年雄性SHR大鼠分为高血压A组、高血压B组。以腹腔注射复方降压片复合足跖部注射福氏完全佐剂（sigma）建立低血压复合慢性炎症痛模型（以下简称血压AA模型），同时建立正常血压复合慢性炎症痛模型和高血压复合慢性炎症痛模型。采用机械刺激缩足阈(PWMT)作为痛阈指标。观察电针治疗前后各组大鼠的痛阈变化。结果：造疼痛模型后,炎侧痛阈值明显减小(P<0•05)；对正常血压A组、低血压A组和高血压A组大鼠进行电针治疗后，痛阈值明显翻转 (P<0•05),且该效应在低血压A组和高血压A组都强于正常血压A组；而不做电针治疗的正常血压B组、低血压B组和高血压B组痛阈无明显变化 (P>0•05)。结论：不同血压水平下电针镇痛效应具有差异性。在低血压和高血压水平下，电针的镇痛效应更强。
获奖情况
- 该项目为浙江中医药大学科研基金项目以及浙江省大学生科技创新项目，荣获省立项资助经费5000元，校配套5000元；同时也荣获浙江中医药大学校级科研基金项目立项资助800元，学院配套400元。而本作品即为该项目的成果。目前正待发表。
鉴定结果
- 通过鉴定
参考文献
- 一、现有技术： 1.低血压大鼠模型制作技术[1] 2.外周佐剂性慢性炎症痛模型制作技术[2] 3.取穴技术[3] 4.电针治疗技术[4] 5.血压检测技术[5] 6.电针镇痛效应检测技术[6] 7.数据分析技术[7] 二、相关技术文献的检索目录： [1] 杨路. 针刺十二原穴对高、低血压大鼠模型血压影响的经穴效应规律研究. 国家重点基础研究发展计划(973计划):87. [2] 张非煜,万有,张震康,傅开元。福尔马林与完全福氏佐剂疼痛模型大鼠脊髓环氧合酶两种亚型表达比较.中国疼痛医学杂志.2008；14(4)：226-229. [3] 于船等.中国兽医针灸学会.中国兽医针灸学:北京农业大学出版社,1984:212. [4] 林文注，王佩等.实验针灸学.上海科学技术出版社，1999:215-217. [5] 邓江,吴芹,黄燮南等. 经大鼠尾动脉无创性血压测量的方法. 遵义医学院学报.2008;31(2):184-186. [6] 杜金,黄宇光,罗爱伦. 普瑞巴林对大鼠慢性炎性疼痛治疗过程中吗啡急性耐受的抑制作用. 中国临床药理学与治疗学.2008; 13(11):1249-1253. [7] 陆守曾等.医学统计学.北京:中国统计出版社,2002:4.
同类课题研究水平概述
- 已有研究发现：血压与疼痛存在相关性。持续血压水平变化与痛感觉相关。疼痛与血压异常在同一个体可同时/相继发生，血压影响疼痛性疾病的防治。血压-疼痛之间存在相互影响的复杂关系。 电针是针灸治疗疼痛的主要方法，其镇痛效应已经得到大量临床实践的证明和广大患者的广泛认同。研究表明：电针可能通过抑制炎性痛病灶局部感觉神经末梢合成、释放SP、IL-1β，从而发挥消炎镇痛作用。 电针对血压也有一定的调节作用。国内外发现：电针刺激神门穴能显著得降低血压；而电针针刺低血压大鼠的人中穴以及刺激大鼠的足三里、曲池、丰隆、内关四穴均可引起升压作用等等。 电针镇痛效应受很多因素的影响。大量研究表明，不同电针刺激参数影响电针镇痛效应，其中包括电针频率、电针强度、电针时间间隔、电针时程以及电针次数。也有学者从个体痛阈值的差异、实验操作因素以及穴位与非穴位因素等方面出发，探究电针镇痛疗效的影响因素。 药物是电针镇痛效应的重要影响因素之一。研究发现某些药物能够加强电针的镇痛疗效，如i•p•褪黑素（MEL）、中缝大核(NRM)内微量注入催产素以及曲马多与电针合用等。还有些药物能够削弱电针的镇痛效应，如：向小鼠脑室内注射少量CaCl2、腹腔注射异博定(verapamil)、中缝大核(NRM)内注入抗催产素血清、局部注射β-内啡肽(β-EP) 抗血清和亮脑啡肽（LEK）抗血清、鞘内注射生长抑素拮抗剂、侧脑室内微量注射L-Arg以及延髓中缝大核(NRM)微量注射L-精氨酸(L-Arg)等。还有一些药物由于不同的定量与定位，能对电针镇痛效应产生不同的影响，如孤啡肽(OFQ)和纳洛酮(naloxone，NX)。 以上研究表明：血压水平与疼痛程度有关，而电针可对血压和疼痛进行调节。其中国内外对于电针镇痛疗效的影响因素已经做了广泛的研究，但目前还没有对血压是否影响电针镇痛疗效进行研究。我们也无法确切的了解不同血压水平对电针镇痛的疗效是否有影响。可见，国内外的针灸疗法对疼痛和血压异常个体均有明确的良性调整作用，但是针灸治疗血压异常性疼痛的疗效缺乏证据。因此有必要针对血压异常个体的疼痛防治开展研究工作，以推进疼痛治疗的临床疗效。
