基本信息
- 项目名称：
- 补阳还五汤预处理对脑缺血再灌注损伤沙鼠海马微血管的保护作用
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 实验应用补阳还五汤预处理脑缺血再灌注长爪沙鼠，通过激光多普勒监测、单宁酸-氯化铁媒染以及电镜等方法观察微血管变化。结果发现，补阳还五汤预处理脑缺血再灌注损伤沙鼠海马微血管抗损伤能力增强，微血管密度及微血管面积比增加，通过减少微血管闭塞，增强微血管再通能力，增加了脑组织血流量，抑制神经元损伤。
- 详细介绍：
- 补阳还五汤对改善脑缺血患者的微循环、下调缺血再灌注损伤诱导的ET-1基因的异常表达，缓解脑血管痉挛，提高再灌注后期NO合成、促进脑出血大鼠脑内VEGF mRNA的表达，调整血管的新生过程及缓解临床症状均有显著的效果，在治疗脑血管疾病方面显示出很好的应用前景。然而，补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤后脑组织血流量、微血管损伤的病理生理过程的影响尚无公识。 从观察缺血再灌注损伤后大脑海马组织中微血管形态结构、数量等变化及因此产生的神经元的损伤入手，以中药方剂补阳还五汤为影响因素，采用激光多普勒血流仪、单宁酸-氯化铁媒染法、HE染色技术和电子显微技术，监测正常对照组、假手术组、模型组、补阳还五汤预处理组脑组织血流量，微血管形态、微血管密度（MVD）和微血管面积比（MVA），神经元形态、神经元密度（ND）以及血脑屏障超微结构变化。探讨补阳还五汤干预对缺血再灌注脑组织的预防性保护作用及其机制。本文充分证实：1、脑缺血再灌注后引起的急性高灌注和延迟性低灌注是脑缺血再灌注损伤的主要因素。2、内皮细胞损伤和微血管功能障碍也是脑缺血再灌注损伤的重要影响因素。3、补阳还五汤预处理可增强微血管抗损伤能力，缓解微血管痉挛，减轻其损伤程度，使MVD及MVA增加；保护BBB，以抑制脑组织水肿，有效调节脑组织血流量，增加脑组织供血供氧，从而达到预防性保护脑缺血再灌注损伤微血管及神经元的目的，可适用于脑卒中高危人群的预防。
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 从观察缺血再灌注损伤后大脑组织中微血管形态结构、数量等变化及因此产生的神经元的损伤入手，以中药方剂补阳还五汤为影响因素，采用激光多普勒、单宁酸-氯化铁媒染法、HE染色技术和电子显微技术，监测假手术组、模型组、补阳还五汤预处理组脑组织血流量，微血管形态、微血管密度和微血管面积，神经元形态、神经元密度以及血脑屏障超微结构变化。探讨补阳还五汤干预对缺血再灌注脑组织的预防性保护作用及其机制。
科学性、先进性及独特之处
- 应用单宁酸-氯化铁媒染法可清晰的显示大脑海马组织内各级微血管，便于对微血管的形态结构、数量、密度的研究，方法简捷易行，效果可靠。本作品应用此法探讨脑缺血再灌注损伤机制以及用补阳还五汤预处理以评价干预效果。迄今为止国内外尚未见相关报道。 将血管保护作为脑缺血性损伤防治的新靶点，进行微血管生物学特性及微血管与神经元之间的关系研究，有可能为脑梗塞的防治开辟新途径。
应用价值和现实意义
- 本文充分证实补阳还五汤可增强微血管抗损伤能力，缓解微血管痉挛，减轻其损伤程度，使微血管密度及微血管面积比增加；保护血脑屏障，以抑制脑组织水肿，有效调节脑组织血流量，增加脑组织供血供氧，从而达到预防性保护脑缺血再灌注损伤微血管及神经元的目的，适用于脑卒中高危人群的预防。
学术论文摘要
- 补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤后脑海马组织血流量、微血管损伤的病理生理过程的影响尚无定论。实验应用补阳还五汤预处理脑缺血再灌注长爪沙鼠，通过激光多普勒监测、单宁酸-氯化铁媒染以及电镜等方法观察微血管变化。结果发现，1、脑缺血再灌注后引起的急性高灌注和延迟性低灌注是脑缺血再灌注损伤的主要因素。2、内皮细胞损伤和微血管功能障碍也是脑缺血再灌注损伤的重要影响因素。3、补阳还五汤预处理脑缺血再灌注损伤沙鼠海马微血管抗损伤能力增强，微血管密度及微血管面积比增加，通过减少微血管闭塞，增强微血管再通能力，增加了脑组织血流量，抑制神经元损伤。
获奖情况
- 1、补阳还五汤预处理对脑缺血再灌注沙鼠海马组织微血管的保护作用.中国组织工程研究与临床康复,已录用,2011年待发表。 2、获得本校大学生课外科技作品竞赛一等奖。
鉴定结果
- 无
参考文献
- 1、赵淑敏,孔祥玉.一种媒染微血管的新方法-单宁酸—氯化铁法[J].解剖学杂志,2001, 24(1):91-92. 2、吴以岭."脉络-血管系统病”新概念及其治疗探讨. 疑难病杂志,2006,4(5):285-287. 3、陈冬, 杨洁红.补阳还五汤抗脑缺血作用的研究进展.中华中医药学刊, 2010,28(1):72-74. 4、Li JM. The temperature-dependent modulation of an inhibitory circuit in hippocampal slices as revealed by a population spike recording is mediated by extracellular adenosine. Jpn Physiol. 2007;7(12):1147-1151. 5、Plaisier F, Bastide M, Ouk T, et al. Stobadine-induced hastening of sensorimotor recovery after focal ischemia/reperfusion is associated with cerebrovascular protection. Brain Res. 2008;120(8):240-249. 6、Durukan A, Tatlisumak T. Preconditioning-induced ischemic tolerance: a window into endogenous gearing for cerebroprotection. Exp Transl Stroke Med. 2010;2(1):2-8. 7、Jung JE, Kim GS, Chen H, et al. Reperfusion and neurovascular dysfunction in stroke: from basic mechanisms to potential strategies for neuroprotection. Mol Neurobiol. 2010;17(4):145-149.
同类课题研究水平概述
- 应用分子生物技术从西医角度探讨补阳还五汤的药理作用是近年的研究热点，仅CNKI就能搜到几千篇相关文献，证实补阳还五汤能抑制钙离子超载、拮抗氧自由基、阻断炎症反应、降低细胞凋亡，改善血液流变学等。但目前有关补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤后脑组织血流量及微血管影响的研究少见报道（王新陆等发现补阳还五汤可在一定程度上下调缺血再灌注损伤诱导的ET-1基因的异常表达,从而缓解脑血管痉挛；刘志龙等发现补阳还五汤可提高再灌注后期NO合成；灿杰等证实补阳还五汤可以促进脑出血大鼠脑内VEGFmRNA的表达，从而调整血管的新生过程）。 目前脑缺血再灌注损伤有关微血管的研究多通过免疫组化法标记内皮细胞，以内皮细胞个数计数微血管密度、或者通过墨汁血管灌注法观察血管数量的变化，还有人应用分子生物学手段通过VEGF、Tie-2、总AKT、磷酸化AKT表达观察药物对脑缺血再灌注血管新生的影响。但目前有关补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤微血管的研究少见报道。 通过PubMed 检索到的文献看，有关补阳还五汤的外文文献多以国人的研究报道为主，主要发表在Journal of Ethnopharmacology 杂志上，报道内容为补阳还五汤对脊髓、心肌缺血再灌注损伤的影响。但有关补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤微血管的研究除了本课题组发表的论文外，尚未见其它报道。 由于以往碱性磷酸酶媒染血管的方法复杂、不能显示血管壁结构，血管充填法和墨汁灌注法时因压力、温度、色素颗粒大小等因素的影响而导致血管显示不全失其自然或不能准确观测血管形态，因此，国内、外脑缺血再灌注损伤微血管及血流量变化的研究报道甚少。 本文应用单宁酸-氯化铁媒染法（此方法简捷易行，重复性好，媒染效果可靠，反差鲜明，不改变原有血管形态结构）观察应用补阳还五汤预处理后脑缺血再灌注损伤微血管数量、形态变化，并与未加保护的缺血再灌注大脑微血管进行比较，研究其对微血管的保护作用；应用激光多普勒血流仪监测脑组织血流量，观察缺血再灌注损伤脑微循环血流量的变化及补阳还五汤预处理后的变化，结果证实：补阳还五汤预处理可使微血管抗损伤能力增强，缓解微血管痉挛，减轻其损伤程度，使MVD及MVA增加；保护BBB，以抑制脑组织水肿，有效调节脑组织血流量，增加脑组织供血供氧，从而达到预防性保护缺血再灌注损伤微血管及神经元的目的。
