主办单位: 共青团中央   中国科协   教育部   中国社会科学院   全国学联  

承办单位: 贵州大学     

基本信息

项目名称:
电刺激对大鼠机械性脊髓损伤干预机制的研究
小类:
生命科学
简介:
本项目应用Allen’s法建立大鼠脊髓损伤模型,采用BBB 评分进行行为功能评估,应用组织芯片、免疫组织化学、Western Blot等技术方法,定位和定性地检测正常组、对照组、电刺激组的损伤段脊髓组织中GFAP、NGF、NT-3、Nestin、IL-1α、TNF-α的表达变化情况,为阐明电刺激促进脊髓损伤修复的作用机制提供实验依据, 为揭示中医针刺的机理奠定基础,具有重大的理论意义。
详细介绍:
针刺是祖国医学的一颗明珠,是促进脊髓损伤修复的有效手段。临床观察表明用针刺治疗外伤性截瘫有明显效果,高锡朋用针刺治疗66例外伤性截瘫病人,疗效达90%,高维滨用夹脊针治疗外伤性截瘫获得显著效果。那么,电刺激能否干预电刺激对大鼠机械性脊髓损伤机制的研究,通过促进脊髓内环境的变化促进脊髓的损伤修复?这是一个值得深入探讨的有实际应用价值的问题。本项目应用Allen’s法建立大鼠脊髓损伤模型,采用BBB 评分进行行为功能评估,应用组织芯片、免疫组织化学、Western Blot等技术方法,定位和定性地检测正常组、对照组、电刺激组的损伤段脊髓组织中GFAP、NGF、NT-3、Nestin、IL-1α、TNF-α的表达变化情况,研究了解电刺激对脊髓损伤的干预作用,了解脊髓损伤内环境的变化,探讨其治疗脊髓损伤的可能机制。为阐明电刺激促进脊髓损伤修复的作用机制提供实验依据, 为揭示中医针刺的机理奠定基础,具有重大的理论意义。

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  • 电刺激对大鼠机械性脊髓损伤干预机制的研究
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作品专业信息

撰写目的和基本思路

目的:探讨电刺激对大鼠机械性脊髓损伤的干预机制,对大鼠脊髓损伤后内环境变化的影响,进而探究其在脊髓损伤修复中的作用。基本思路:运用Allen’s法造大鼠脊髓损伤模型,用BBB 评分进行行为功能评估,应用组织芯片、Western Blot等技术,检测正常组、对照组、电刺激组的损伤段脊髓组织中GFAP、NGF等因子的表达变化情况,为阐明电刺激促进脊髓损伤修复的作用机制提供实验依据

科学性、先进性及独特之处

科学性:运用SPSS17.0软件,针对各组BBB评分数值、阳性细胞数和平均积分光密度值,采用完全随机设计方差分析后进行LSD检验,以平均数±标准差表示。独特性:电刺激组损伤后给予夹脊穴和足三里穴位电刺激治疗。先进性:将组织芯片技术运用到免疫组织化学染色中,以观察GFAP、NGF、NT-3、Nestin、IL-1α、TNF-α的表达变化,用Western blot半定量检测各因子量的表达变化。

应用价值和现实意义

电刺激能否干预电刺激对大鼠机械性脊髓损伤机制的研究,通过促进脊髓内环境的变化促进脊髓的损伤修复?这是一个值得深入探讨的有实际应用价值的问题。因此,本研究了解电刺激对脊髓损伤的干预作用,了解脊髓损伤内环境的变化,探讨其治疗脊髓损伤的可能机制。为针刺和电刺激应用于临床治疗脊髓损伤提供理论依据,对脊髓损伤的康复治疗提供指导作用,具有十分重要的理论意义和应用价值。

学术论文摘要

目的 探讨电刺激对脊髓损伤后GFAP、NGF等因子表达变化的影响,研究电刺激对损伤后脊髓内环境的影响,进而探讨电刺激在脊髓损伤修复中的作用。结果 BBB评分显示:对照组BBB评分小于正常组,在第5d和第7d时,电刺激组BBB评分的增加幅度明显高于对照组。免疫组织化学检测结果及Western blot检测结果显示:电刺激组与对照组比较,GFAP、IL-1α、TNF-α的表达减少,NGF、NT-3、Nestin的表达增加。方法 选健康成年SD大鼠,随机分为3组,即为正常组、对照组、电刺激组。采用Allen’s法制造大鼠损伤模型,并对三组均进行BBB评分、免疫组织化学及Western blot检测GFAP、Nestin 、NGF、NT-3、IL-1α、TNF-α的表达情况。结论 本实验结果提示电刺激通过抑制脊髓损伤的炎症反应,抑制脊髓星型胶质细胞的增殖,促进神经生长因子的表达,对脊髓损伤进行再生修复,从而有利于减轻炎症反应,减少胶质瘢痕形成,创造良好的神经再生的微环境。

获奖情况

1.张莹莹、胡成功。《电刺激对大鼠脊髓损伤后GFAP与IL-1α表达的影响 》医学院大学生创新实验大赛论文汇编,2011。 2.杨彪、李红军《电刺激对大鼠脊髓损伤后白细胞介素-1α、肿瘤坏死因子-α表达变化的影响 》,医学院大学生创新实验大赛论文汇编,2011。 3.李瑞、兰小娇《电刺激对大鼠脊髓损伤后NT-3、TNF-α的表达影响》医学院大学生创新实验大赛论文汇编,2011。 4.陈虹等《电刺激对大鼠脊髓损伤后神经生长因子表达的影响》,医学院大学生创新实验大赛论文汇编,2011。 5.卢帆、李典《电刺激对脊髓损伤大鼠Nestin与GFAP表达的影响》成都医学院大学生创新实验大赛论文汇编,2011。 上述论文于2011年在成都医学院大学生创新实验大赛中荣获“一等奖”。

鉴定结果

论文为本实验团体共同撰写,实验采用合理的实验设计,运用正确的统计方法,记录真实的结果。

参考文献

1、丁晓晶,王红星,王彤. 脊髓损伤大鼠运动训练方式的研究进展[J ].中国康复医学杂志,2010,25(6):589. 2、乔鸿飞,兰宾尚,刘亦恒. 电针刺激对脊髓损伤大鼠免疫功能及HPA轴功能的影响[J]. 中围康复医学杂志,2008,23(9):828. 3、何丽娜 ,袁章 ,陈炜 ,等. 电刺激治疗脊髓损伤的实验及临床研究进展[J].中国康复理论与实践,2009,15(8):720. 4、李一帆,陈 东,张大威,等. 急性大鼠脊髓损伤Allen’s法模型的改良及电生理评价[J].中国实验诊断学,2010,14(8):1169. 5、张慰民.夹脊穴定位的研究.上海针灸杂志,1987,(4):23. 6、斋藤基一朗,王昌立,何维为.电针刺激猫“足三里”的脊髓突触变化的实验研究.神经解剖学杂志,1989, 5(2): 157.

同类课题研究水平概述

脊髓损伤(Spinal cord injury, SCI)是严重危害人类健康的脊柱脊髓疾患,常致严重伤残,引起各种并发症,严重影响患者的身心健康和生存质量,甚至危及生命。脊髓损伤后,胶质细胞大量增生,胶质炎症反应和胶质瘢痕的形成与增强是加重神经损伤和功能障碍的主要原因。 目前,临床上采用电刺激治疗脊髓损伤,其实验研究方面取得的成果主要作用表现在3个方面:① 减轻继发性脊髓损伤,促进脊髓神经再生。② 缓解肌肉痉挛,防止肌肉萎缩,改善肌肉形态和功能。③ 改善膀胱功能。有研究表明,利用选择性电刺激技术可以激活骶神经根中直径小的副交感神经从而引起膀胱逼尿肌的收缩,并使尿道括约肌的收缩越来越小,引起排尿。电刺激促进脊髓损伤后功能的恢复已得到众多实验证实,在实验及临床研究中已经取得重大进步。将电刺激与细胞移植结合在一起以及其他联合应用的方法正在受到越来越多研究者的重视。
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