基本信息
- 项目名称：
- 雷公藤内生真菌的分离及抗肿瘤活性菌株筛选
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 该研究采用微生物分离纯化技术从雷公藤嫩茎和叶中获得75株不同性状的菌株，并采用MTT法对发酵产物进行体外抗肿瘤活性筛选,发现绝大多数菌株萃取物对不同肿瘤细胞均具有不同程度的细胞毒活性，并对4株具有较强的选择性细胞毒活性菌株进行了初步鉴定。
- 详细介绍：
- 据WHO统计，过去几年来全球每年死于恶性肿瘤的病人高达700万人以上，恶性肿瘤正逐年成为世界死亡人数最多的疾病。因此全球对选择性高，副作用小的抗肿瘤药物的需求也随之急速增长。抗肿瘤药物以往主要来源于植物和海洋生物等途径，从植物内生真菌中获取具有药用价值的天然产物不仅可以突破植物资源缺乏，再生周期长等限制，而且利用工业化发酵还可以实现天然活性化合物大规模、低成本、无污染的生产。 近年来人们从药用植物内生真菌中分离得到许多具有抗肿瘤活性的物质，例如，从短叶红豆杉内生真菌次生代谢产物中分离得到紫杉醇，从长春花的内生真菌次生代谢产物中分离得到长春新碱类似物等。目前，从内生真菌代谢产物中寻找具有抗肿瘤活性的结构新颖的先导化合物正逐渐成为新的研究方向，该研究对开发新型抗肿瘤药物具有重要意义。 植物内生真菌是一个庞大的特殊的真菌类群，几乎所有的植物组织中都发现有内生真菌的存在。由于真菌与植物之间长期的相互作用和共同进化，其代谢产物十分丰富，包括杀虫、抗菌和抗肿瘤等活性物质。因此，植物内生真菌现已成为寻找抗肿瘤药物的重要来源。 我国药用植物资源十分丰富，对其内生真菌的研究将有利于我国微生物药物的开发和珍稀植物资源的保护。本文采用微生物分离纯化技术，从采自江苏省雷公藤生产基地的雷公藤茎及叶中分离得到75株不同形态的内生真菌；并选用BGC823（人胃癌细胞）、HCT-8（人结肠癌细胞）、Bel-7402（人肝癌细胞）、A549（人肺癌细胞）、A2780（人卵巢癌细胞）为指标，采用MTT法对其发酵产物进行体外抗肿瘤活性筛选，结果显示大多数菌株均具有不同程度的细胞毒活性，部分菌株具有较强的选择性细胞毒活性；根据内生真菌的形态特征并参阅陆家云的《植物病原真菌学》、《中国的真菌》和H.L.巴尼特《半只菌属图解》等书籍对较强活性的菌株进行分类、鉴定确定分类地位。 本研究为企业及临床解决了雷公藤植物资源缺乏问题，为进一步新药研究奠定基础，并且对发展植物内生真菌理论也具有重要意义。
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作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 撰写目的：从雷公藤中分离纯化出内生真菌，并对其发酵产物进行体外抗肿瘤活性筛选，为进一步寻找并发现新型先导化合物，进行新药研究奠定基础。 基本思路：采用微生物分离纯化技术从雷公藤嫩茎和叶中分离纯化内生真菌，选用BGC823、HCT-8、Bel-7402、A549、A2780为指标，采用MTT法对发酵产物进行体外抗肿瘤活性筛选,并对细胞毒活性较强菌株进行初步鉴定。
科学性、先进性及独特之处
- 该研究采用微生物分离纯化技术从雷公藤嫩茎和叶中获得75株不同性状的菌株，并采用MTT法对发酵产物进行体外抗肿瘤活性筛选,发现绝大多数菌株萃取物对不同肿瘤细胞均具有不同程度的细胞毒活性，并对4株具有较强的选择性细胞毒活性菌株进行了初步鉴定，研究思路清晰，研究方法科学，研究结果明确，与人们生活紧密结合，在临床医学上具有很强的实用性。
应用价值和现实意义
- 该研究发现了雷公藤中具有抗肿瘤作用的内生真菌，为进一步新药研究奠定了基础；利用工业化发酵实现天然活性化合物大规模、低成本、无污染的生产，不仅可以满足企业和临床的需求，而且还可以保护珍稀、濒危药用植物资源，有较好的应用前景。该研究对发展植物内生真菌理论也具有重要意义。
学术论文摘要
- 目的：从雷公藤茎及叶中分离内生真菌，并对其发酵产物进行体外抗肿瘤活性筛选。方法：采用微生物分离纯化技术从雷公藤嫩茎中分离纯化内生真菌，选用BGC823（人胃癌细胞）、HCT-8（人结肠癌细胞）、Bel-7402（人肝癌细胞）、A549（人肺癌细胞）、A2780（人卵巢癌细胞）为指标，采用MTT法对发酵产物进行体外抗肿瘤活性筛选。结果：从雷公藤根、茎及叶中分择性抑制作用。结论：雷公藤内生真菌种类多样，具有很好的研究和应用价值离纯化得到75株内生真菌，其中4株内生真菌发酵产物对不同肿瘤细胞具有显著选。
获奖情况
- 无
鉴定结果
- 无
参考文献
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同类课题研究水平概述
- 植物内生真菌是指生活在植物体内或生活史的一定阶段处于植物体内的真菌，它的涵盖面相当广，包括菌根真菌和植物病原菌(梁宇和高玉葆 2000；Lu et al, 2000；Service, 2000)。也有人认为内生真菌是指存在于健康植物的茎叶中，不形成明显病症的真菌(Lu et al, 2000；Service, 2000)； 植物内生真菌在植物微生态系统中长期与宿主建立了和谐的联合关系,其次生代谢产物十分丰富(梁宗琦 1999)。 1991年,美国蒙大拿州立大学植物病理系有机化学家 A. Stierle 从短叶红豆杉的韧皮部分离到一株产新型抗癌物质紫杉醇的内生真菌 Taxomyces andreanae（Stierle et al，1993），引起人们对植物内生真菌抗肿瘤活性的极大注意，以后从多种植物内生真菌中陆续分离到紫杉醇等抗肿瘤活性物质(Noh et al., 1999；Strobel et al., 1996；Li et al., 1998)。表明了植物内生真菌是人们寻找新型抗肿瘤药物的重要来源。 近年来从多种药用植物内生真菌中筛选获得的各种生理活性物质产生菌陆续见有报道（马天有和董兆麟，1999；李海燕等，1999 王伟等， 1999；邱德有等，1994；王建锋等，1999； Zhang et al，1998）。但从雷公藤中纯化分离筛选获得具有抗肿瘤活性的菌株尚未见报道。
