基本信息
- 项目名称：
- 白芷总香豆素对川芎嗪在大鼠体内的药动学影响
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 本研究主要内容包括以下两个方面: 1. 采用回流提取的方法提取白芷总香豆素，以欧前胡素为指控指标，香豆素含量52.04﹪； 2.建立川芎嗪和白芷总香豆素同时大鼠灌胃给药后川芎嗪体内测定HPLC法,获得川芎嗪及与白芷总香豆素配伍后的药代动力学参数，说明两药配伍的合理性，其配伍机理可能与肝药酶有关。
- 详细介绍：
- 为了探讨川芎和白芷药效作用物质与肝药酶的关系，本实验拟用回流提取法从白芷中提取白芷总香豆素,选用Wistar大鼠研究川芎嗪及与白芷总香豆素配伍使用后药代动力学规律，与前期欧前胡素对P450酶抑制试验结果相比较，从药代动力学角度出发,探讨两药配伍机理，为临床用药提供科学依据，为中药配伍研究提供新的思路和方法。 1. 本实验以75%乙醇为溶剂,采用回流提取法提取白芷总香豆素，该法较渗漉法等其他提取方法具有耗时短、溶剂消耗少、提取效率高等特点。白芷提取液经旋转蒸发浓缩后所得浸膏采用D-101型大孔树脂分离纯化，在蒸发浓缩过程中得到黑色沉淀物,干燥后经检测其TCD含量为52.04%，符合中药药用部位的含量要求。 2.以川芎中的主要有效成分川芎嗪和白芷中的主要有效成分白芷总香豆素配伍，对大鼠进行灌胃试验，建立血浆蛋白沉淀法处理血样的方法，以及建立给药白芷总香豆素后定量检测川芎嗪的HPLC-UV法,获得相关药代动力学参数，与前期体外酶试验结果相比较，分析对比体内外的实验结果，说明两药配伍的合理性，探讨两药的配伍机理，并为指导临床合理用药提供药动学实验依据。
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 本课题探讨川芎和白芷药效作用的物质基础,并从药物对肝药酶的影响阐述川芎嗪（TMP）和白芷总香豆素（TCD）相互作用的关系。实验用回流提取法从白芷中提取得到白芷总香豆素,以wistar大鼠为动物模型，研究TMP和TCD配伍使用后，与单体TMP药时曲线相比其药动学参数（T1/2、Tmax、Cmax、AUC0−∞等）的变化。
科学性、先进性及独特之处
- 本研究考察了TCD对TMP在大鼠体内的药动学行为影响，首次对两药的药效物质基础进行了配伍研究。根据临床用药量设计实验给药剂量，考察肝药酶CYP3A4对两药主要有效成分相互作用的影响，并对其作用机理进行探讨，为临床合理用药提供参考依据。
应用价值和现实意义
- 指导临床合理用药,为临床配伍用药提供科学依据，为中药配伍研究提供新的思路和方法。
学术论文摘要
- 摘要 目的: 建立合用白芷总香豆素(TCD)后川芎嗪（TMP）在大鼠血浆中的含量检测方法;并研究配伍TCD后对TMP在大鼠体内药代动力学的影响。方法: 大鼠灌胃TCD提取物30min后，再灌胃TMP，取血并制备血浆，血浆样品经甲醇：乙腈(1:3,V/V)沉淀蛋白。用HPLC-UV法测定大鼠血浆中TMP浓度。色谱柱为：ODS-2 HypersilC18(250mm×4.6mm,5μm)，流动相为水相-乙腈-甲醇（69:10:21，V/V/V），流速为1.0 ml/min；波长：290nm。结果: 大鼠血浆中TMP血药浓度在0.24～30μg/ml（R2=0.9999）内线性关系良好，最低检测浓度0.24μg/ml，在低、中、高3个质量浓度的提取回收率分别为64.40%、68.14%、66.75%，RSD<10%;配伍TCD后，TMP的T1/2 、 Tmax 、 Cmax 等药代动力学参数有显著差异。结论: 本方法具有简便、灵敏、专属性强等特点，可应用于定量测定合用TCD后TMP在大鼠血浆中的含量及其药动学研究;TCD与TMP配伍后, 显著延长TMP在大鼠体内的滞留时间,提高其生物利用度。
获奖情况
- 1. 研究论文《合用白芷总香豆素提取物后川芎嗪大鼠血浆测定方法的建立》已投稿于中国医药核心期刊《药物评价研究》杂志。 2. 研究论文《In Vitro and In Vivo Studies for Potential Metabolic Drug-Drug Interactions among Isoimperatorin/Imperatorin and Tetramethylpyrazine》已投稿于《Pharmaceutical Research》(SCI收录，影响因子3.2)
鉴定结果
- 无
参考文献
- TMP是川芎的主要活性成分，临床上治疗头痛时川芎常配伍白芷使用，TMP在大鼠体内的药动学过程符合二房室模型，并呈现吸收快、代谢快等特点。但目前关于TMP的药动学报道多为其单体研究，且有关配伍后TMP药代动力学的研究报道甚少[1-2]，我们建立了配伍TCD给药后TMP在大鼠体内血药浓度的检测方法,并从肝药酶对药物代谢影响的角度，结合药代动力学参数对两药配伍的机理进行探讨，首次从药动学角度阐述两药配伍的合理性。 参考文献： [1] 魏凤环，任沁沁. 川芎嗪药动学研究近况[J].中药材，2008,31.(5):793-796. 检索目录：R285.5 [2] 陈海南，李沙，王兴立，等. 大鼠静脉注射川芎嗪体内药动学研究[J].中草药，2010,33(10):1599-1602. 检索目录：R285.5
同类课题研究水平概述
- 1 研究背景 配伍用药是中药临床应用的主要形式。众多的中药复方虽然临床疗效确切，但长期以来临床应用主要根据中医理论和经验用药，对其作用机制的内涵、物质基础、尤其是药代动力学研究比较薄弱，因此中药复方要得到国际医药学术界的理解和认同还有一定距离，这也影响了中药走向世界[1]。实际上，中药复方的核心就是药物之间的配伍，要阐明复方的作用机制，必先探究其配伍规律。白芷、川芎相配伍治头痛，历史久远。含川芎、白芷药对的治头痛的名方如川芎茶调散、芎芷石膏汤、芎芷细辛汤、神术汤等。 根据以往文献报道[2-4]，川芎中主要活性成分TMP为肝药酶CYP3A4的代谢底物，因而在肝脏中容易被肝药酶代谢而失去活性。前期实验基础表明白芷中的香豆素类成分具有抑制CYP3A4酶活性的作用，因此我们推断当白芷与川芎配伍时，白芷香豆素类成分可能因抑制肝药酶活性使TMP的代谢消除减慢，从而延长TMP在体内发挥作用的时间。本研究拟从药代动力学的角度出发，研究TCD与川芎中主要活性成分TMP在大鼠体内的药动学情况，获得两药配伍在大鼠体内的药动学参数，结合体外酶试验的结果，深入探讨其配伍机理，从药酶代谢的角度为临床用药提供理论依据。 2 国内外研究现状及发展趋势 TMP是川芎中的主要活性生物碱，具有扩张血管等药理作用，临床上被广泛用于缺血性脑血管病的治疗并取得较好疗效。据文献报道[5]，CYP3A4是介导 TMP生物转化的 CYP450亚酶，TMP与 CYP3A4酶抑制或诱导药合用可能存在药物间的相互作用。 白芷中主要含有香豆素类成分，其中包括简单香豆素及其苷。药理实验证明白芷香豆素具有平喘、降压等药理作用[6]。其中香豆素成分中以欧前胡素和异欧前胡素含量最高，国内外有多篇文献对其药动学行为进行报道，在动物体内符合二房室模型，具有分布快消除快的特点。 前期高通量筛选酶抑制剂实验的结果表明，白芷香豆素成分对CYP3A4酶具有较强的抑制作用。本实验拟通过大鼠体内药代动力学试验，研究TMP和TCD配伍使用后，与单体TMP药时曲线相比，其药动学参数的变化。结合体外酶促动力学的研究结果，解析中药成分间的药动学相互作用规律及与药效学之间的内在联系等，为揭示传统中药配伍理论科学内涵和临床合理配伍用药提供直接依据。
