基本信息
- 项目名称：
- 牦牛血免疫球蛋白IgG提取纯化工艺研究
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 本作品以新鲜牦牛血液为原料，研究低温无水乙醇沉淀法提取IgG的工艺。通过单因素和L16（45）正交试验，优化出最佳工艺条件为：蒸馏水稀释倍数为3倍，乙醇添加量的百分比浓度为25%，pH值为4.5，NaCl溶液的浓度为0.15 mol/L，提取得到的IgG经DEAE cellulose-52柱层析后电泳测定纯度≥95%。
- 详细介绍：
- 本试验将用柠檬酸钠抗凝处理过的新鲜牦牛血4℃离心10min,转速8000r/min，取上清，将待分离样品蒸馏水混合，置冰浴中冷却，在强烈搅拌条件下，加入预冷的无水乙醇，保持在冰浴中，使其产生沉淀，将沉淀悬浮于NaCl溶液中，调pH形成沉淀，取上清，将上清调pH7.4左右，加入预冷的无水乙醇，保持在冰浴中，使其产生沉淀，所得到的沉淀为粗品IgG。将经过预处理的DEAE cellul...(查看更多)
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作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 本研究以新鲜的牦牛血液为原料，采用有机溶剂沉淀法从牦牛血红细胞中提取IgG，通过单因素和正交试验确定提取工艺的最佳参数，然后利用凝胶层析和电泳技术对所提取的IgG进行纯化并对其进行测定。通过试验，开发一条可切实可行从牦牛血中提取免疫球蛋白的工艺，从而使屠宰行业产生的大量污染环境的血资源得到充分的利用，给其在终端产品的应用上提供相应的应用依据，使免疫球蛋白产品成为人类健康的保障。
科学性、先进性及独特之处
- 1．以牦牛血液为原料制备免疫球蛋白未见报道，选题具有一定的创新性：目前免疫球蛋白的提取都是从牛奶、蛋黄等及其他动物血液中提取，对牦牛血液中免疫球蛋白的提取利用较少。2．作品没有用传统盐析法而是采用冷乙醇法提取免疫球蛋白IgG，其成本低，速度快，成品安全，结合柱层析法纯化得到高纯度IgG，方法切实可行，为工业化生产提供技术支撑。
应用价值和现实意义
- 本作品针对目前牦牛屠宰后血液大量浪费甚至污染环境的现状，探索可规模化从牦牛血中提取纯化免疫球蛋白IgG的工艺流程和优化工艺参数，为牦牛血的在保健品和食品的应用中提供工艺路线和科学依据，同时也为其它血液功能性蛋白资源的应用提供可借鉴的思路和方法。
学术论文摘要
- 本作品以新鲜牦牛血液为原料，研究低温无水乙醇沉淀法提取IgG的工艺。通过单因素和L16（45）正交试验，优化出最佳工艺条件为：蒸馏水稀释倍数为3倍，乙醇添加量的百分比浓度为25%，pH值为4.5，NaCl溶液的浓度为0.15 mol/L，提取得到的IgG经DEAE cellulose-52柱层析后电泳测定纯度≥95%。
获奖情况
- 暂无
鉴定结果
- 用低温乙醇沉淀提取的IgG经DEAE cellulose-52纯化后纯度较高，与标准品一致。
参考文献
- [1] Friend B. A., Shahani K. M., Mathur B. N., etal. Newer advanced in human milk substitutes for infant feeding[J]. J. Applied Nutr. 1983(35): 88-93. [2] Gin drat J, Gotherfors, L, Hanson. L...(查看更多)
同类课题研究水平概述
- 国内外对免疫球蛋白的分离纯化开展了一定的研究，主要方法是盐析法和有机溶剂法。李敏康提出猪血浆中多种功能蛋白的连续提取工艺，岳喜庆做了有关牛血清免疫球蛋白的盐析法提取与纯化的试验研究。研究报道主要集中在采用饱和硫酸铵盐析法进行，Barsukov进行了饱和硫酸铵法提取血清中IgG最佳条件的研究，胡晓艳提出饱和硫酸铵法提取IgG工艺的优化，刘生杰将免疫球蛋白G(IgG)三种提取方法进行...(查看更多)
