基本信息
- 项目名称：
- 不同产地草珊瑚中3种活性成分的含量变异研究
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- （1）项目创新性的以异嗪皮啶、迷迭香酸和反丁烯二酸三种指标性成分的含量来综合评价草珊瑚的质量。 （2）项目采集15个不同产地的草珊瑚进行上述三种成分含量的测定并绘制指纹图谱。
- 详细介绍：
- （一）项目研究背景 草珊瑚（又名肿节风）为常用中药，主要分布于福建、浙江、江西等省区。草珊瑚具有抗菌消炎、清热解毒、祛风除湿等功效，用于治疗各种炎症性、风湿关节痛和疮疡肿毒等疾病。《中华人民共和国药典》2010版一部收载其作为法定药材使用，同时以草珊瑚为原料的草珊瑚片、血康口服液、复方草珊瑚含片也已收入药典。此外，草珊瑚还被广泛应用于食品、保健品、日用化工等方面。随着用途的日益拓宽，草珊瑚原料的需求量将不断的增加，市场前景十分广阔。所以草珊瑚人工的栽培是保障草珊瑚产业持续发展的必然途径。目前，全国很多地区都在开展草珊瑚的人工种植工作，但是我们对于全国草珊瑚药材的品质如何? 到目前为至，尚未有明确的答案。 （二）项目研究内容 草珊瑚课题组成员在查阅大量国内外相关课题文献的基础上创新性的以异嗪皮啶、迷迭香酸和反丁烯二酸三种指标性成分的含量来综合评价草珊瑚的质量。该项目采集15个不同产地的草珊瑚进行上述三种成分含量的测定并绘制指纹图谱， （三）项目研究的现实意义 （1）社会效应该项目成果作为重要的技术支持使福建省三明市林下种植草珊瑚基地被中国中药协会种植养殖专业委员会认定为“中国优质道地药材示范基地”。当地林农获悉这个结果后开展林下种植草珊瑚，种植的草珊瑚经济成熟期每2年收一茬,亩平均产量320kg，产值500~800元/亩。解决了林农分到林地后，种什么？怎么种？的重大问题。 （2）经济效应 “中国优质道地药材示范基地”种植的草珊瑚为全国制药企业带来了新的发展，比如为江中制药生产的拳头产品草珊瑚含片、厦门中药厂生产的主打产品新癀片和漳州片仔癀药业股份有限公司生产的复方片仔癀片提供了质量更优的草珊瑚原料。 （3）生态效应林下栽植草珊瑚，增加了森林群落中的生物量，充分利用了光、热、水等自然资源，同时也增加了地表覆盖，减少了地表径流，起到明显的水土保持作用。
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作品专业信息
撰写目的和基本思路
- （一）作品撰写目的 项目创新性的以异嗪皮啶、迷迭香酸和反丁烯二酸三种指标性成分的含量来综合评价草珊瑚的质量。 （二）项目研究思路 （1）遴选有效成分作为草珊瑚质量评价指标体系 ①药典规定的异嗪皮啶等香豆素类成分 ②部颁标准中规定的反丁烯二酸等有机酸类成分 ③文献报道的迷迭香酸成分 （2）研究制定三类指标性成分的质量评价方法
科学性、先进性及独特之处
- 《药典（2005版）》和部颁标准中草珊瑚药材主要以异嗪皮啶含量作为质控指标，《药典（2010版）》对草珊瑚药材在异嗪皮啶的基础上新增了迷迭香酸作为含量测定指标，也曾有HPLC法测定草珊瑚药材中另一有效成分反丁烯二酸含量的文献报道，但从未见过对异嗪皮啶、迷迭香酸和反丁烯二酸三种成分同时进行测定的报道。且目前还未发现有以这三种成分在根，茎，叶中的含量建立的多指标成分来反映药物整体质量的评价体系。
应用价值和现实意义
- （一）项目的实际应用价值 （1）建立草珊瑚各有效成分测定的方法及化学成分指纹图谱； （2）树立中药材品质意识，为更全面评价草珊瑚的品质提供科学依据； （3）对草珊瑚的道地性进行研究，为企业的生产及经营提供重要的参考。 （二）项目的现实意义草珊瑚应用广泛，通过对草珊瑚品质和质量标准的深入研究，拓展草珊瑚资源的应用空间，形成生产、加工一条龙的体系，对欠发达地区农民增收具有重要的意义。
学术论文摘要
- 方法: 色谱柱：Sapphire C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm), 流动相：乙腈（A）-0.1%的磷酸溶液（B），梯度洗脱（0-7min,A:2% -20%,B:98%-80%;7-30min,A:20%,B:80%），流速：1.0 mL•min-1；进样量：10μL；检测波长：208nm；柱温：30℃。结果: 反丁烯二酸、异嗪皮啶和迷迭香酸分别在0.1016-0.7112μg (r=0.9999)、0.0204-0.1428μg (r=0.9999)和0.0212-0.1484μg (r=0.9995)范围内与峰面积呈良好的线性关系，回收率分别为105.28%、RSD为1.396%（n=6），105.14%，RSD为2.077%（n=6），96.18%，RSD为1.816%（n=6）。 讨论：（1）15个产地异嗪皮啶含量差异显著，最高三元吉口产地是2010药典的25倍。 （2）迷迭香酸含量江西九江产地最高。 （3）反丁烯二酸含量福建元吉产地最高。 （4）肿节风虽以全草入药，但根、茎、叶等不同部位中反丁烯二酸，异嗪皮啶和迷迭香酸的含量差别较大。
获奖情况
- （1）2010年6月入选大学生创新性实验计划项目 （2）2011年6月参加第十届“挑战杯”省大学生课外学术科技作品竞赛并最终参与总决赛答辩
鉴定结果
- 本课题作为导师成果《草珊瑚优良种质资源筛选及快繁技术研究》的主要内容，于2010年3月10日通过省级鉴定会。鉴定结论是该项目“已完成合同规定的各项任务，创新点突出，成效显著。成果达到国内领先水平。
参考文献
- 参考文献 [1] 陆颂规.肿节风的研究进展[J].中药材,2001,24(8):606-608. [2] 亦良.肿节风主要成分的药理作用研究 [J].Anticancer,2002(4):41. [3] 王菲,袁胜涛,朱丹妮. 肿节风抗肿瘤活性部位的化学成分[J].中国天然药,2007，5(3):174-177. [4] 孙文娟,李 晶,兰凤英,等. 肿节风注射液抗小鼠肝癌 Hep-A-22的作用及毒性[J].中成药,2003,25(4):313-315. [5] 孙文娟,李 晶,兰凤英,等. 肿节风注射液抗小鼠前胃癌 FC的作用及毒性[J].中药新药与临床药理,2003,14(3):168-171. [6] 王刚力,陈道峰,林瑞超. 肿节风的化学成分及其制剂质量控制研究进展[J].中草药,2003,34（8）:附12-14. [7] 应国清,陆红娅,王鸿,等.中药肿节风的研究进展[J].上海中医药杂志,2007,41(6):85-87. [8] 黄明菊,李妍岚,曾光尧,等. 肿节风化学成分研究[J].中南药学,2007,5(5):459-461. [9］ 谭小鸿,张援虎,张荣祥.HPLC 法测定草珊瑚中反丁烯二酸含量的方法学研究亚太传统医药，2009,5(8):43-46. [10] Xiaohua Xiao,Zongning Guo,Jianchao Deng.Separation and purification of isofraxidin from Sarcandra glabra by microwave-assisted extraction coupled with high-speed counter-current chromatography[J]. Separation and Purification Technology,2009:250-254.
同类课题研究水平概述
- 草珊瑚研究进展 摘要：通过查阅近年来的文献对肿节风在含量测定方面进行综述，为进一步研究草珊瑚提供参考和借鉴。 关键词：肿节风；含量测定；异嗪皮啶 1 含量测定 1.1 提取方法 在《中国药典》 2005 年版一部中，测定了肿节风中异嗪皮啶的含量，该方法为用水浸泡放置过夜，超声提取再用，三氯甲烷分次振摇提取，三氯甲烷液蒸干，甲醇定容。张萍等对提取方法进行了优化，首先对提取溶剂进行了选择，分别用乙酸乙酯、三氯甲烷、甲醇超声处理 30min，测定异嗪皮啶的峰面积,结果甲醇提取测定的含量较高 , 故采用甲醇作为提取溶剂。另外对提取时间进行了优化，分别用甲醇加热回流 1h、超声处理(功率220W、频率50 kHz) 20、30、40min 提取测定含量,结果发现加热回流1h 和超声处理30min 提取测得的含量较高，故采用超声处理30min 较合理。最终确定了的提取方法，该法较药典的提取方法更简捷、快速，而且操作误差小。 《中国药典》2010年版一部修订了05版药典的提取不足，直接采用甲醇回流提取1小时，操作简单，提取率高。因此我们采用新版药典的提取方法。 1.2 波长的选择 反丁烯二酸、异嗪皮啶和迷迭香酸对照品在紫外可见分光光度计下扫描，结果反丁烯二酸在只在210nm处有最大吸收，异嗪皮啶和迷迭香酸在210nm、344nm处均有吸收，张广财等采用高效液相色谱波长切换同时测定肿节风中反丁烯二酸(210nm)、异嗪皮啶(344nm)、落新妇苷(290nm)的含量。 我们选择208nm作为3成分的共同检测波长。在此波长下，反丁烯二酸有最大的吸收，异嗪皮啶和迷迭香酸测得的含量高于344nm 1.3 流动相的选择 《中国药典》 2005 年版一部测定异嗪皮啶含量采用流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(20:80)等度洗脱。闵芳等人采用乙腈-0.2%磷酸溶液(30:70),流速0.5 mL•min-1测定异嗪皮啶的含量；反丁烯二酸采用乙腈-0.01mmol•L-1磷酸二氢钾(5:95)为流动相，流速0.4 mL•min-1。 采用药典的流动相等度洗脱，反丁烯二酸出峰太快，分离度、对称性都不好。在药典的基础上改为梯度洗脱，反丁烯二酸、异嗪皮啶和迷迭香酸分离度、对称性均较好。
