基本信息
- 项目名称：
- 香蕉枯萎病拮抗内生菌的分离、筛选及生防菌株抗菌谱测定
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 为获得对香蕉枯萎病菌有高拮抗活性的内生菌株，本项目从南药植物中进行分离筛选，最终从阴香中获得一株皿内拮抗效果突出，盆栽防效理想，抑菌谱广的内生细菌YXG2-3，初步鉴定为李斯特氏菌属格氏李斯特氏菌（Listeria grayi）。对于该菌株应用国内外尚未见报道。
- 详细介绍：
- 香蕉枯萎病近年来给我国香蕉产业带来了较大的威胁，它的生防手段的研究也越来越受到人们的重视。植物内生菌是在植物组织内和植物共生的一类微生物，它不受外界环境的影响而长期存活，因此利用拮抗性内生菌来进行生物防治具有独特的优势。为获得对香蕉枯萎病菌有较好拮抗活性的内生菌株，本研究采用组织表面消毒法对变叶木、益智、阴香、槟榔、椰子和菠萝蜜6种植物进行内生菌分离。实验共获得91株内生菌株，其中内生细菌45株，内生真菌38株，内生放线菌8株。以香蕉枯萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp. cubense）为靶标菌，对分离的内生菌株进行皿内拮抗活性筛选，发现内生真菌、内生放线菌抑菌效果不理想，内生细菌YXG2-3拮抗效果最好，抑菌率达51.52%，其次是BYG2-5、BYJ5-1、YXJ2-2。对4株内生细菌进行盆栽试验，发现菌株YXG2-3防效最好，达到63.8%，与其他处理达极显著水平。YXG2-3分离自植物阴香，对其进行8个属的10种靶标菌株抗菌谱测定，发现该菌株抑菌范围较广，抑菌率均在50%以上，对该菌株进行革兰氏染色观察及生理生化特性测定，将该菌株初步鉴定为李斯特氏菌属格氏李斯特氏菌（Listeria.grayi）。关于该菌株的研究，国内尚属首例，并无相关报道。
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作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 撰写目的：由于近年来香蕉枯萎病的发生给我国香蕉产业造成巨大的经济损失，而化学防治存在一定的安全隐患，因此采用生防手段防治该病害具有重要的意义。基本思路：本项目从生防角度出发，从南药植物中分离筛选拮抗内生菌，以期获得抗菌谱广、防效理想菌株，为微生物防治香蕉枯萎病提供理论依据，为海南建设生态省的政策实施奠定基础。
科学性、先进性及独特之处
- 本项目选取海南省丰富的南药植物作为供试分离植物资源，进行香蕉枯萎病拮抗内生菌的分离筛选，此项研究工作在国内尚属首次开展；项目所获得高拮抗活性菌株格氏李斯特氏菌（Listeria.grayi）国内外研究较少，本项目首次发现该菌株对香蕉枯萎具有很好的拮抗作用，盆栽效果明显，抑菌谱广。
应用价值和现实意义
- 通过项目实施从南药阴香中分离获得一株对香蕉枯萎病原菌拮抗活性高，抗菌谱广，应用前景好的的菌株。从南药中分离筛选香蕉枯萎拮抗内生菌国内尚属首次研究，所获得的菌株格氏李斯特氏菌（Listeria.grayi）国内外没有应用方面的报道，因此本项目开展不仅推动了海南省香蕉枯萎病生物防治方面的研究，丰富了海南省生防微生物资源库，而且填补了该菌株应用方面的研究空白，同时为该菌株的进一步深入研究与应用提供依据。
学术论文摘要
- 为获得对香蕉枯萎病菌有较好拮抗活性的内生菌株，本研究采用组织表面消毒法对变叶木、益智、阴香、槟榔、椰子和菠萝蜜6种植物进行内生菌分离。实验共获得91株内生菌株，其中内生细菌45株，内生真菌38株，内生放线菌8株。以香蕉枯萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp. cubense）为靶标菌，对分离的内生菌株进行皿内拮抗活性筛选，发现内生真菌、内生放线菌抑菌效果不理想，内生细菌YXG2-3拮抗效果最好，抑菌率达51.52%，其次是BYG2-5、BYJ5-1、YXJ2-2。对4株内生细菌进行盆栽试验，发现菌株YXG2-3防效最好，达到63.8%，与其他处理达极显著水平。对菌株YXG2-3进行8个属的10种靶标菌株抗菌谱测定，发现该菌株抑菌范围较广，抑菌率均在50%以上，对该菌株进行革兰氏染色观察及生理生化特性测定，将该菌株初步鉴定为李斯特氏菌属格氏李斯特氏菌（Listeria grayi）。
获奖情况
- 《香蕉枯萎病拮抗内生菌的分离、筛选及盆栽防效试验》.《植物检疫》已收录.（本人为第一作者）
鉴定结果
- 本项目获得省级“挑战杯”二等奖
参考文献
- [1]王芳,严进,吴品珊.香蕉枯萎病的检测与监控 [J].植物检疫,2007,21(5): 301~303. [2]邱式邦,杨怀.生物防治-害虫综合防治的重要内 容[J].植物保护,2007,33(5):1-6. [3]肖爱萍,游春平,梁关平,等.香蕉枯萎病拮抗菌 的筛选及其作用机制研究.植物保护,2006,32 (4):53~56. [4]殷晓敏,陈弟,吴红萍,等. 香蕉内在拮抗细菌研 究Ⅰ-菌株B215的分离及分子鉴定.热带作物学 报,2008,29(5):636~640. [5]周德庆.微生物学实验手册[M].上海,上海科学 技术出版社, 1983. [6]骆焱平，王兰英，谢颕，等. 内生细菌BYG2-5 对芭蕉炭疽菌的生防作用及鉴定. 华中农业大 学学报, 2011, 30(3): 10-14. [7]George M. Garrity，Julia A. Bell， Timothy G. Lilburn.TAXONOMIC OUTLINE OF THE PROKARYOTES BERGEY’S MANUAL OF SYSTEMATIC BACTERIO (伯杰氏系统细菌 学手册(2004版) )[M].DOI:10.1007/ bergeysoutline200405，2004，35.
同类课题研究水平概述
- 香蕉是我国南方的五大名果之一，是国内消费和出口创汇的一个重要资源。但是，香蕉枯萎病给我国香蕉生产带来极大了威胁。香蕉枯萎病又称香蕉巴拿马枯萎病，由古巴尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum f.sp. cubense）引起，是一种毁灭性香蕉真菌病害，属于对外检疫对象。目前对于香蕉枯萎病防治主要依靠农业防治和化学防治，但农业防治难以大面积普及。另外，大量使用化学农药不但会污染土壤，对当地生态环境也会造成严重破坏。生物防治作为一条安全有效的防治途径，越来越受到人们的重视。 国外关于香蕉枯萎病所报道的拮抗细菌有绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)、粘质沙雷菌(Serratia marcescens)和荚壳伯克氏菌(Burkholderia glumae)、荧光假单胞杆菌(Pseudomonas fluorescens)和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、伯克霍尔德菌（Burkholderia cepacia）。国内除发现枯草芽孢杆菌能明显抑制香蕉枯萎病菌菌丝外，还发现迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tard)、绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)、恶臭假单胞菌(Pseudomonas utida) 、类芽孢杆菌(Paenibacillus)和成团肠杆菌(Enterobacter agglomerans)对该病原菌有较为理想的抑制作用。本研究首次发现李斯特氏菌属格氏李斯特氏菌（Listeria grayi）对香蕉枯萎病有较强的拮抗作用。 植物内生菌是在植物组织内和植物共生的一类微生物。国内外关于内生菌拮抗香蕉枯萎病的报道较少，研究者们主要是从生长正常的香蕉假茎、叶片以及根中进行分离筛选拮抗菌株，本项目从6种南药植物中分离、筛选内生生防菌株，这些研究工作在国内尚属首次开展。 关于李斯特氏菌属格氏李斯特氏菌的研究未曾涉及到它的应用方面，而本项目测定了其对8个属的10种靶标真菌菌株抗菌谱，发现该菌株抑菌范围较广，相关研究在国内外尚未见报道。 本项目的进行将推动海南省香蕉枯萎病生物防治方面的研究进展，项目中获得的生防内生菌株将成为海南省生防农药深入研究与生产的基础，因此，本项目对促进生物防治手段的应用，减少化学农药使用量，及建设生态省政策的实施都具有重要的意义。
