主办单位: 共青团中央   中国科协   教育部   中国社会科学院   全国学联  

承办单位: 贵州大学     

基本信息

项目名称:
板栗疫病菌Rab蛋白Ypt7的定位和功能研究
小类:
生命科学
简介:
本研究构建pcpxHY2-ypt7-GFP载体,利用绿色荧光蛋白对板栗疫病菌Rab蛋白Ypt7进行定位,发现Ypt7定位于液泡内。利用高效基因打靶系统Δcpku80敲除板栗疫病菌ypt7基因,获得基因缺失突变体,通过观察基因缺失株与正常菌株之间的性状变化,明确该基因的功能,在板栗疫病菌的致病力上有新的突破。
详细介绍:
Rab族蛋白是小G蛋白Ras家族最大的亚家族之一。研究表明它主要参与细胞内的囊泡运输,调节生物体内各种蛋白在细胞内外的正确运输和分配。我们在进行板栗疫病菌基因组序列分析时,发现一个与酵母菌Rap基因ypt7有高度同源性的基因, 并将其命名为cpypt7。研究发现ypt7基因与致病性和自噬相关。本研究克隆了cpypt7,利用绿色荧光蛋白对该基因编码的蛋白进行了准确定位,并采用基因敲...(查看更多)

作品专业信息

撰写目的和基本思路

研究目的:对板栗疫病菌Rab蛋白Ypt7进行定位并对该蛋白进行功能研究,明确cpypt7基因与板栗疫病菌的致病力的关系。 基本思路:本实验采用绿色荧光蛋白基因作为标记基因对Ypt7的位置进行定位,并通过基因敲除的方法将cpypt7基因敲除,获得cpypt7基因的缺失菌株,对基因缺失株和野生株之间的菌落形态、产孢量及致病力的差异,明确基因的功能。

科学性、先进性及独特之处

科学性:本研究克隆了cpypt7,将其与GFP基因构成融合基因,转染细胞进行表达,可对Ypt7进行观察。并采用基因敲除对该基因的功能进行研究。先进性:本研究首次在板栗疫病菌中研究与Rab蛋白Ypt7的定位和功能。研究过程中应用的方法对其它病原真菌的研究起到借鉴作用。独特之处:本研究发现Rab蛋白Ypt7定位于在板栗疫病菌的液泡,cpypt7的表达会影响到板栗疫病菌的菌落形态、产孢量、致病力。

应用价值和现实意义

本作品加深了对板栗疫病菌Rab的认蛋白的认识,研究过程中应用的方法对其它病原真菌的研究起到借鉴作用,为将来改进真菌病害防治方法提供了新知识。

学术论文摘要

Rab族蛋白是小G蛋白Ras家族最大的亚家族之一。研究表明它主要参与细胞内的囊泡运输,调节生物体内各种蛋白在细胞内外的正确运输和分配。我们在进行板栗疫病菌基因组序列分析时,发现一个与酵母菌Rap基因ypt7有高度同源性的基因, 并将其命名为cpypt7。研究发现ypt7基因与致病性相关。本研究克隆了cpypt7,利用绿色荧光蛋白对该基因编码的蛋白进行了准确定位,并采用基因敲除的方...(查看更多)

获奖情况

无。

鉴定结果

无。

参考文献

[1] Hebard F V, Griffin G J, Elkins J R. Developmental Histopathology of Cankers Incited by Hypovirulent and Virulent Isolates of Endothia-Parasitica on Susceptible and Resistant Chestnut Tre...(查看更多)

同类课题研究水平概述

真核生物内膜系统各细胞器之间存在着脂类和蛋白之间的运输,这是通过复杂的囊泡运输和微管系统来完成的。Rab小G蛋白作为膜相关的分子开关,是囊泡形成、转移和融合过程中的核心调节因子,在囊泡的形成、转运、粘附、锚定、融合等过程中起作用。最新的人类基因组测序结果表明,人类至少有70个Rab蛋白[7]广泛存在于各染色体。就某个Rab而言,在哺乳动物和酵母中功能是保守的。板栗疫病是一种世界范...(查看更多)
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