基本信息
- 项目名称：
- 中国林蛙蛙油形成机理的内分泌学研究
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 林蛙油作为功效奇特的中药材收录于《中华人民共和国药典》（2005年版），由我国长白山地区的中国林蛙冬眠前膨大的输卵管晒干制成。本研究使用人工饲养的商品蛙为实验动物，将中国林蛙输卵管季节性发育进程作为关注点，首次从东北林蛙输卵管冬眠前膨大发育的特殊生理现象出发，以生殖内分泌角度为切入点，探究输卵管膨大的内在调控机理，为林蛙油的开发与利用提供科学依据。
- 详细介绍：
- 本研究采用解剖学观察，形态学统计，组织学观察，免疫印迹，免疫组织化学等方法，确认了： 冬眠前期输卵管的增生是细胞增殖的结果； 原癌基因c-kit所表达的受体蛋白在冬眠前期表达强烈； 结论：中国林蛙输卵管的发育呈现出明显的季节性变化，管内小叶中的基质细胞在冬眠前期表现出强烈细胞增殖的现象，c-kit/SCF信号系统在输卵管增生过程中发挥正向调控。
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 申报者以生殖内分泌学角度为切入点，欲探究输卵管膨大的内在调控机理，为林蛙油的开发与利用提供科学依据。 申报者从林蛙油形成的源头出发，以冬眠前形成蛙油的膨大输卵管作为实验模型，利用生殖生理学方法，阐述蛙油形成的机理。
科学性、先进性及独特之处
- 本研究采用解剖学观察，形态学统计，组织学观察，免疫印迹和免疫组织化学等现代生命科学的经典研究手段，首次阐述中国林蛙输卵管冬眠前膨大发育这一特殊生理现象的内在调控机理，项目研究结果可服务于林蛙不断发展的产业化需求。
应用价值和现实意义
- 此项研究是林蛙生殖内分泌学研究的基础一环，研究结果可为人工科学饲养中国林蛙、林蛙蛙油产量和质量的提高以及林蛙可持续开发和利用提供科学的参考依据。
学术论文摘要
- 本项研究的目的是检测c-kit受体蛋白在中国林蛙输卵管冬眠前的免疫活性。研究中，冬眠前期输卵管的组织学结构得到了详尽的观察。为了确定输卵管组织是否经历增殖，我们使用了增殖性细胞核抗原(PCNA)作为细胞增殖的标记。输卵管的组织切片利用多克隆兔源c-kit受体蛋白和增殖性细胞核抗原(PCNA)的抗血清通过卵白素-生物素-过氧化物酶复合物法进行免疫学定位研究。输卵管的总蛋白经提取后用于免疫印迹分析。c-kit受体蛋白和增殖性细胞核抗原(PCNA)的免疫活性在冬眠前的输卵管组织中得以确认。免疫印迹的分析也表明c-kit受体蛋白和增殖性细胞核抗原(PCNA)在冬眠前的输卵管中存在印迹条带。以上的实验结果表明：c-kit受体蛋白对中国林蛙输卵管的膨大发育产生调控作用。 关键词：c-kit受体蛋白、输卵管、中国林蛙
获奖情况
- 论文投稿 论文已投稿到SCI源杂志《兽医科学杂志》（The Journal of Veterinary Medical Science）,并已接收发表，修改完毕即可正式发表。 学会发表 前期研究部分成果已成功发表在第44届生殖生物学年会（美国，波特兰，2011），杂志影响因子为3.469。 竞赛获奖 2011年第七届北京林业大学“梁希杯”课外学术论文大赛一等奖 2010-2011年度第六届首都六大高校生命科学论坛最佳创意奖
鉴定结果
- 此项研究从生殖内分泌学角度揭示林蛙输卵管异常发育形成蛙油这一特殊生理学现象的本质，项目研究运用了现代生物学技术手段，取得的结果真实可靠，部分结果投稿于SCI源杂志。
参考文献
- [1] 张颖才, 哈什蟆油[J]. 中药通报, 1956. 2（5）：205～207. [2] 陈国富，王立中等, 林蛙的开发利用价值. 特种经济动植物, 1999. 3：11. [3] 李东风，陈伟庭, 中国林蛙研究进展. 辽宁师范大学学报（自然科学版）, 2005. 28（1）：92～93. [4] Daniel J. Bernard, S.C.C., and Teresa K. Woodruff, Mechanisms of Inhibin Signal Transduction. Recent Prog. Horm. Res., 2001. 56(417). [5] Sporn & AB Roberts. Heidelberg, S.-V.M.J., How cells read TGF-beta signals. Nature Reviews. Molecular and Cellular Biology, 2000 1: p. 169–178. [6] Hoggard, N., et al., Inhibin beta B expression in murine adipose tissue and its regulation by leptin, insulin and dexamethasone. J Mol Endocrinol, 2009. 43(4): p.171-7. [7] Kajsa Sjo¨holm , J.P., Theodore C. Lystig , Eva Jennische ,Teresa K. Woodruff , Bjo¨rn Carlsson , Lena M.S. Carlsson The expression of inhibin beta B is high in human adipocytes, reduced by weight loss, and correlates to factors implicated in metabolic disease. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2006. 344 p. 1308–1314.
同类课题研究水平概述
- 中国林蛙的输卵管呈现出季节性发育变化的特征：相对于其他时期，在9、10月份的冬眠前期，输卵管经历了极其繁盛的膨大发育进程。然而，这种季节性发育在解剖学乃至生理学上的研究数据仍不够深入，因此，从生殖生理学角度出发，对中国林蛙输卵管发育季节性变化的确认成为了本项研究的出发点。 冬眠是温带动物在与食物获得局限性相偶联的气候恶劣时期所采取的一种主要生存策略。冬眠期，摄食和排泄随代谢和体温的下降而停止，为了保证在无摄食条件下继续存活，能量必须在极短的冬眠前期以脂肪形式储存在体内，导致了冬眠前的脂肪化。 中国林蛙是在生殖系统中表现出冬眠前的脂肪化——输卵管脂肪化——也即林蛙在冬眠前期一个极短的时期内将脂肪迅速储存在生殖系统的输卵管内。另一方面，冬眠前输卵管中高度形态建成的细胞来自于大量可形态发生细胞的分化，而细胞在此之前的增殖成为细胞形态发生的前提，也是输卵管成熟发育始动阶段的关键进程。因此，由于对中国林蛙输卵管在冬眠前的脂肪态分化与在此之前的细胞增殖从生殖内分泌学角度的确认仍是空白，所以这也成为本项研究进一步深入考虑的问题。 对于中国林蛙输卵管冬眠前期膨大的生理学研究所做甚少，然而，其巨大的经济价值和特殊的生理现象，使中国林蛙成为一个极具科学研究价值的野生两栖动物的生殖生理模型。因此，本项研究以林蛙输卵管发育的季节性进程为核心，探究不同生理因子对发育进程各个阶段的调控影响。
