基本信息
- 项目名称：
- 忍冬、灰毡毛忍冬及其嫁接种植株花蕾化学成分的分析对比
- 来源：
- 第十一届“挑战杯”国赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 金银花为忍冬科忍冬Lonicera japonica Thunb.的干燥花蕾或带初开的花。灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides Hand.-Mzt亦为忍冬科植物，与忍冬同属，其花蕾也可以药用。《中华人民共和国药典》（2000年版一部）将其列为金银花的原植物之一，由于其花蕾成分与忍冬差异较大，所以在2005年药典中将其列为山银花。将灰毡毛忍冬嫁接到忍冬植株上，可以显著提高药材的产量，但产出花蕾的质量究竟发生了何种变化？是接近忍冬还是接近灰毡毛忍冬？作为金银花应用还是作为山银花应用？目前尚无人对此进行研究。本文对忍冬、灰毡毛忍冬及其嫁接植株花蕾化学成分进行了分析对比，旨在探讨嫁接植株花蕾的药用价值。通过测定三种样品水溶性浸出物（冷浸法）和醇溶性浸出物（热浸法）的含量；用紫外分光光度法测定其总黄酮含量，用高效液相法分别测定其木犀草苷、绿原酸的含量。实验得到，水溶性浸出物与醇溶性浸出物含量均以忍冬植株花蕾最高，嫁接植株花蕾最低，灰毡毛忍冬植株花蕾居中。总黄酮含量、绿原酸含量均以灰毡毛忍冬最高，忍冬最低；木犀草苷含量以忍冬最高，其次是嫁接植株，灰毡毛忍冬最低，后二者含量明显低于《中国药典》（2005年版）标准。从而得到结论，嫁接种植株花蕾的药材质量介于金银花与山银花之间，其化学成分与灰毡毛忍冬更加接近，所以其花蕾不宜用作金银花使用。
- 详细介绍：
- 随着时代发展与人们消费观念的改变，中医药重新受到国际社会的关注，中药的需求量大幅度增加，但我国中药产品的销售量在国际天然药物市场份额中所占比例仍然很低，其主要原因在于中药品种来源复杂，中药材的质量不稳定，并且缺乏有效的控制手段。因此中药品种的选定是中药现代化的一个关键步骤。 金银花Flos Lonicerae为常用临床用药，全国年需求量在1000万kg以上，并且呈逐年上升趋势，是需求量最大的中药材之一。《中华人民共和国药典》（2005年版一部）规定，金银花为忍冬科忍冬Lonicera japonica Thunb.的干燥花蕾或带初开的花。灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides Hand.-Mzt亦为忍冬科植物，与忍冬同属，其花蕾也可以药用。《中华人民共和国药典》（2000年版一部）将其列为金银花的原植物之一，由于其花蕾成分与忍冬差异较大，所以在2005年药典中将其列为山银花。将灰毡毛忍冬嫁接到忍冬植株上，可以显著提高药材的产量，但产出花蕾的质量究竟发生了何种变化？是接近忍冬还是接近灰毡毛忍冬？作为金银花应用还是作为山银花应用？目前尚无人对此进行研究。本文对忍冬、灰毡毛忍冬及其嫁接植株花蕾化学成分进行了分析对比，旨在探讨嫁接植株花蕾的药用价值。 1.材料、仪器、试剂 1.1材料 忍冬与嫁接（忍冬作为砧木，灰毡毛忍冬作为接穗）植株花蕾取自山东省平邑县，灰毡毛忍冬花蕾取自湖南省隆回县，均为多年生正常生长植株，5～6月份蕾期采收，晒干，备用。样品均经山东中医药大学周凤琴教授鉴定。 1.2仪器 FA1104型电子天平；电热恒温水浴锅；ZB101-1型电热鼓风干燥箱；250ml锥形瓶；蒸发皿；定量滤纸；漏斗；球形冷凝管等。UV-754分光光度计；JY型电子天平；电热恒温水浴锅。 Waters2695-2996自动进样器；二极管阵列监测器； FA1104型电子天平。岛津LC-10ATVP（手动进样器）；岛津SPD-10AVP 230V LVD；KQ-250E型超声清洗器； 1.3试剂 芦丁对照品（中国药品生物制品检定所）、木犀草苷对照品(购自北京禾原天然产物科技公司标准品供应中心)。乙腈（色谱纯）；甲醇(色谱纯)；水为纯化水；其它试剂为分析纯。 2. 实验方法与结果 2.1水溶性浸出物含量测定 ：采用药典法规定的冷浸法。 测得忍冬水溶性浸出物含量平均值为45.37±0.08%；灰毡毛忍冬含量平均值为37.46±0.13%，；嫁接种植株含量平均值为33.38±0.52%。结果显示，忍冬植株花蕾水浸出物含量最高，其次是灰毡毛忍冬，嫁接植株花蕾含量最低，三者相互之间均有显著性差异。 2.2醇溶性浸出物含量测定：采用药典法规定的热浸法。 测得忍冬醇溶性浸出物含量平均值为37.06±0.19%；灰毡毛忍冬含量平均值为33.27±0.286%；嫁接种植株含量平均值为25.28±0.71%。结果显示，花蕾醇浸出物含量变化趋势与水浸出物相同，也以忍冬最高，灰毡毛忍冬其次，嫁接植株最低，三者之间均有显著性差异。 2.3总黄酮含量测定：以芦丁为对照品，采用紫外分光光度法于510nm测定。 结果表明，芦丁对照品在浓度0.0116～0.0947mg/ml范围内线性关系良好，其回归方程为：Y=－0.0203＋11.9000X ，γ=0.9996。精密度测定、重现性考察、稳定性考察、加样回收试验符合要求。 经测定，总黄酮含量，忍冬为2.32±0.078%；灰毡毛忍冬为4.15±0.134%；嫁接种植株为3.55±0.097%；测定结果显示，灰毡毛忍冬植株花蕾总黄酮含量最高，其次是嫁接植株，忍冬最低，三者之间均有显著性差异。 2.4木犀草苷含量测定：采用HPLC法。色谱条件：Kromasil100A C18 柱(250×4.6mm,5um)；流动相：以乙腈为流动相A，以0.5%冰醋酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱；流速1ml/min；检测波长350nm；理论塔板数不低于2000。以峰面积对进样量进行回归，木犀草苷在0.106～0.795µg范围内线性关系良好，线性方程方程式：y＝147667x＋64394，r=0.9999。精密度测定、重现性考察、稳定性考察、加样回收试验符合要求。 测定结果显示忍冬木犀草苷平均含量为0.126%，；灰毡毛忍冬木犀草苷平均含量为0.018%，嫁接种植株木犀草苷平均含量为0.054%。由此得出，忍冬植株花蕾木犀草苷含量最高，其次是嫁接植株，灰毡毛忍冬最低，三者之间具有显著性差异。灰毡毛忍冬与嫁接植株花蕾中的木犀草苷含量明显低于《中国药典》（2005年版一部）标准。 2.5 绿原酸含量测定：采用HPLC法。色谱条件：Kromasil100A C18 柱(250×4.6mm,5um)；流动相：乙腈-0.4％磷酸溶液（13：87）；流速1ml/min；检测波长327nm；理论塔板数按绿原酸计算不低于1000。按色谱条件进行测定，以峰面积对进样量进行回归，得绿原酸线性方程式：y＝167447x＋6762，r=0.9997，线性范围为0.192～0.672µg。精密度测定、重现性考察、稳定性考察、加样回收试验符合要求。 经测定，花蕾绿原酸含量：忍冬为1.80±0.045%，灰毡毛忍冬为4.20±0.060%，嫁接种植株为2.20±0.050%；叶片绿原酸含量：忍冬为0.433±0.015%，灰毡毛忍冬为1.095±0.015%，嫁接种植株为0.565±0.009%。从而得到结论，灰毡毛忍冬花蕾与叶片的绿原酸含量最高，其次是嫁接植株，忍冬花蕾与叶片的绿原酸含量最低，三者之间均有显著性差异。 3.结论 本研究结果表明，除浸出物含量外，嫁接植株花蕾各成分含量均处于忍冬与灰毡毛忍冬之间。这也说明，嫁接种植株花蕾的药材质量介于金银花与山银花之间。将灰毡毛忍冬枝条嫁接到忍冬砧木上形成的嫁接植株，其生长发育主要是灰毡毛忍冬枝条继续生长发育的结果，所以它的化学成分与灰毡毛忍冬更加接近。由于是两种植物愈合生长在一起，嫁接植株多少也会受到忍冬遗传特性的影响，所以嫁接植株与灰毡毛忍冬并不完全相同，介于忍冬与灰毡毛忍冬之间。特别是嫁接植株花蕾中的木犀草苷含量明显低于《中国药典》（2005年版一部）标准，所以不宜用作金银花。
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 目的：对忍冬、灰毡毛忍冬及其嫁接种花蕾的化学成分进行了分析对比，探讨嫁接种植株花蕾的药用价值。 基本思路：测定其叶片与花蕾等器官的浸出物、总黄酮、木犀草苷、绿原酸等成分含量。确定嫁接种植株花蕾的药用价值。
科学性、先进性及独特之处
- 本论文首次从生产实际出发，对忍冬、灰毡毛忍冬及其嫁接种花蕾的化学成分进行了分析对比。为确保药材的产量与质量奠定了坚实的基础，具有重要的实用价值。该论文设计合理，技术手段先进，数据充实完善，结果可信，并在生产实际中进行了推广。经科技查新，未见相关研究。
应用价值和现实意义
- 金银花为中医临床常用中药，为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或带初开的花。灰毡毛忍冬为与忍冬同属的忍冬科植物，其花蕾也可药用，在临床上作为山银花入药。灰毡毛忍冬、忍冬的嫁接植株抗寒性增强，在山东已进行大田生产并形成产品。本文对上述三种植株花蕾的化学成分进行了分析对比，旨在探讨嫁接种植株花蕾的药用价值。这对于实现中药现代化，保证临床治疗效果，保障人们身体健康意义重大。
学术论文摘要
- 目的：对忍冬、灰毡毛忍冬及其嫁接种花蕾的化学成分进行了分析对比，探讨嫁接种植株花蕾的药用价值。方法：利用中药化学的技术手段，测定其叶片与花蕾等器官的浸出物、总黄酮、木犀草苷、绿原酸等成分含量。结论：本研究结果表明，水与乙醇浸出物含量均以忍冬植株花蕾最高，嫁接植株花蕾最低，灰毡毛忍冬植株花蕾居中。花蕾总黄酮含量以灰毡毛忍冬最高，忍冬最低；木犀草苷含量以忍冬最高，灰毡毛忍冬最低；绿原酸含量以灰毡毛忍冬最高，忍冬最低。叶片绿原酸含量与花蕾具有相同的变化趋势。除浸出物含量外，嫁接植株花蕾各成分含量均处于忍冬与灰毡毛忍冬之间。这也说明，嫁接种植株花蕾的药材质量介于金银花与山银花之间。将灰毡毛忍冬枝条嫁接到忍冬砧木上形成的嫁接植株，其生长发育主要是灰毡毛忍冬枝条继续生长发育的结果，所以它的化学成分与灰毡毛忍冬更加接近。由于是两种植物愈合生长在一起，嫁接植株多少也会受到忍冬遗传特性的影响，所以嫁接植株与灰毡毛忍冬并不完全相同，介于忍冬与灰毡毛忍冬之间。所以不宜用作金银花。
获奖情况
- 无
鉴定结果
参考文献
同类课题研究水平概述
- 金银花是需求量最大的中药材之一。全国多数省份均在开展人工种植，相关的研究主要如下：①灌水量对忍冬发育及其花蕾质量的影响，检索到相关文献4篇，结果表明金银花在生产实践中要加强水分管理。②金银花修剪对产量与质量的影响，检索到相关文献8篇，结果表明修枝整形是提高金银花产量的一个重要措施。③金银花的嫩枝扦插，检索到相关文献2篇，结果表明金银花嫩枝扦插育苗和传统方法相比，具有生根快、成活率高、成本低及多排根在节间同时发育而根系发达的特点。④研究不同类型叶面肥对忍冬生长发育及金银花质量的影响，检索到相关文献3篇，结果表明：高N 型叶面肥可促进忍冬生长发育．提高金银花产量和质量，较适合用于金银花生产。⑤其它关于金银花一般种植技术的文献数量众多。但没有忍冬嫁接种的研究内容。 忍冬属于多年生木质藤本植物，生长生产周期较长，良种选育工作进展缓慢。试图将灰毡毛忍冬引种到山东种植，但由于环境不适应，冬天不经保暖难以越冬，难以推广。将灰毡毛忍冬嫁接到忍冬植株上，增强了植株的抗寒性，冬季稍加保暖就能安全越冬，植株的丰产性状保持优良。但其质量如何？目前无人研究。为此我们对忍冬、灰毡毛忍冬及其嫁接种花蕾的化学成分进行了分析对比，旨在探讨嫁接种植株花蕾的药用价值。 网上检索查得有关金银花的专利有：从金银花中提取制备绿原酸的工艺 ，金银花快速克隆培苗技术 ，一种金银花和黄芩提取物与对乙酰氨基酚组合药物及其制备方法 ，金银花软胶囊制剂及其制备方法 ，灰毡毛忍冬金银花高效繁殖技术，一种高效提取金银花有效成分的新方法，中药材金银花行间套种紫花苜蓿的栽培方法，一种含金银花挥发油的注射液处方及其制备方法 ，一种由金银花粗提物制备高纯度绿原酸的方法 ，一种复方金银花有机酸药物组合物及其制剂制备方法 ，道地性金银花聚合酶链反应-限制性酶切图谱鉴定方法 ，金银花筛选机，装配式金银花塔，金银花中药饮料，金银花和万寿果套种立体栽培的方法，金银花中绿原酸的提取纯化方法，一种金银花啤酒及其制备方法，金银花多肽、制备方法及用途，一种金银花有机酸及其制备方法和检测分析方法，金银花膏的制备方法，一种复方金银花有机酸药物组合物及其制剂制备方法，金银花鲜花饮品的制作方法，金银花妇科炎症药液，一种金银花提取物的制备方法，金银花提取物及其制备方法和应用 ，共26项。其中未见忍冬及其嫁接种方面的专利。
