基本信息
- 项目名称：
- 同步荧光技术6-TG探针测定生物样品中蛋白质
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 在最佳实验条件下，HSA-6-TG体系的同步荧光峰出现在约310nm处，而且同步荧光强度与HSA浓度在0.69~552.0μg•mL-1的范围成正比。线性相关系数为0.9994。检测限可达0.133μg•mL-1。 据其灵敏度高，光谱简化，谱带窄化，能避免不同的干扰影响的优点，建立了以6-TG为分子探针，测定人血清、唾液和尿液等生物样品中的蛋白质含量的新方法。
- 详细介绍：
- 硫鸟嘌呤是一种具有广泛生物活性的核苷药物中间体，具有抗癌、抗病毒活性。它对于急性淋巴白血病和其他的肿瘤都有显著的疗效。该方法在药理学、临床医学及化学方面都有重要意义和研究价值。 在本实验中，同步荧光技术用于测定人体样品中的HSA， 扫描HSA-6-TG体系的同步荧光光谱。固定6-TG的浓度，同步荧光强度与人血清白蛋白的浓度呈正比。因此，这种使用6-TG为分子探针的同步荧光技术测定人体体液(血清、尿样、唾液)中蛋白质的方法，结果令人满意。在最佳实验条件下，6-TG可以与HSA形成复合物，当HSA浓度增加时，同步荧光强度也相应增强。结果表明此方法简单，快速，灵敏度高和线性范围宽，可成功用于测定人血清、尿液和唾液样品中的蛋白含量。
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 撰写的目的：因同步荧光法具众多优点。以6-TG为分子探针应用同步荧光光谱技术来测定蛋白含量。 基本思路：在最佳实验条件下，6-TG可与HSA形成复合物，当HSA浓度增加，同步荧光强度也相应增强。结果表明此方法可成功用于测定人血清、尿液和唾液样品中的蛋白含量
科学性、先进性及独特之处
- 同步扫描荧光测定具有使光谱简化、谱带窄化、减小光谱的重叠现象和减小散射光的影响的优点，操作简便、试剂不玷污器壁、灵敏度高、重现性好、线性范围宽和测定结果可靠等优点，可直接用于生物样品中蛋白质总量的测定。
应用价值和现实意义
- 蛋白质与营养代谢、细胞结构、酶、激素、病毒、免疫、遗传等密切相关。其定量研究更是临床中诸如恶性肿瘤、糖尿病、肾功能衰退、肝硬化、结核病、外科手术等许多疾病诊断不可缺少的内容。因此具有很大的实际应用价值和现实意义。
学术论文摘要
- 以硫鸟嘌呤为分子探针的同步荧光技术，已经应用于测定体液中的人血清蛋白。在最佳实验条件下，HSA-6-TG体系的同步荧光峰出现在约310nm处，而且同步荧光强度与HSA浓度在0.69至552.0μg•mL-1的范围成正比。线性相关系数为0.9994。检测限可达0.133μg•mL-1。据此，建立了以6-TG为分子探针，测定人血清、唾液和尿液等生物样品中的蛋白质含量的新方法。在人体液样品分析中，平行测定的相对标准偏差为0.55至3.31%，回收率可达96.17至105.0%。
获奖情况
- 无
鉴定结果
- 本作品建立了6-TG为分子荧光探针同步荧光技术测定蛋白质的新方法。该方法具有操作简便、灵敏度高、测定结果可靠等优点，可直接用于生物样品(血清、尿样、唾液)中蛋白质总量的测定。该方法技术居国内领先水平。
参考文献
- 同步荧光技术 R.P. Jia, L.J. Dong, Q.F. Li, X.G. Chen, Z.D. Hu, A highly sensitive assay for protein with dibromochloro-arsenazo-Al3+ using resonance light scattering technique and its application, Talanta 57 (2002) 693-700. O.H. Lowry, N.J. Rosebrough, A.L. Farr, R.J. Ranjall, J. Biol. Chem. 193 (1951) 265. M.M. Bradford, Anal. Biochem. 72 (1976) 248. F.L. Rodkey, Clin. Chem. 11 (1965) 478. Q.G. Liao, Y.F. Li, C.Z. Huang, Talanta. 71 (2007) 567–572.
同类课题研究水平概述
- 蛋白质化学是生命科学研究的前沿领域。蛋白质与营养代谢、细胞结构、酶、激素、病毒、免疫、物质运载、遗传等密切相关。研究蛋白质与小分子作用的形式及机理，利用小分子探针定量分析蛋白质是生物化学和其它生物学科、食品检验、诊断疾病、临床医学、药物化学等领域研究的热点之一。血清白蛋白是动物和人体血浆中最重要的载体蛋白，是血浆中最重要的蛋白质，其定量研究更是临床中诸如恶性肿瘤、糖尿病、肾功能衰退、肝硬化、结核病、外科手术等许多疾病诊断不可缺少的内容。因此开展其分析测定方法及其临床方面的研究，有着非常重要的现实和发展意义。目前测定蛋白质含量的方法有多种，常用的经典方法有Lowery法、Bradford法、溴酚蓝法、溴甲酚绿法等，但这些方法或灵敏度较低、或线性范围窄、或存在较强的吸附作用；近来又建立了一些测定蛋白质的新方法如分光光度法、荧光光度法、共振光散射法、化学发光法和电化学法。其中荧光光度法，由于具有简单、快速、灵敏度高等优点而备受关注。同步扫描荧光测定具有使光谱简化、谱带窄化、减小光谱的重叠现象和减小散射光的影响的优点，已成功应用与多组分的同时测定和生物分子的分析研究中。本作品建立了6-TG为分子荧光探针同步荧光技术测定蛋白质的新方法。该方法具有操作简便、试剂不玷污器壁、灵敏度高、重现性好、线性范围宽和测定结果可靠等优点，可直接用于生物样品(血清、尿样、唾液)中蛋白质总量的测定。该方法技术居国内领先水平。
