基本信息
- 项目名称：
- HMBA对鼻咽癌细胞CNE2增殖抑制作用研究初探
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 了解环六亚甲基二乙酰胺（HMBA）对鼻咽癌细胞CNE2生长抑制的作用。实验说明HMBA具有一定的抑制鼻咽癌细胞CNE2增殖的作用。
- 详细介绍：
- 方法：采用MTT实验，分别以1 mmol/L 、3 mmol/L 、5 mmol/L、 7mmol/L、9 mmol/L HMBA在体外对鼻咽癌细胞CNE2作用24h、48h、72h、96h不同时间，检测490nm波长时相应吸光度，统计分析实验组和对照组细胞生长的差异。结果：HMBA处理的鼻咽癌细胞CNE2经过一定适应期后，倒置相差显微镜下发现细胞形态发生改变：细胞呈现长梭形，甚至呈星形，有突起，细胞数量减少。MTT实验生长曲线及抑制曲线显示，实验组细胞增殖速率显著减慢（P<0.05），HMBA最佳抑制浓度为5 mmol/L。结论：HMBA具有一定的抑制鼻咽癌细胞CNE2增殖的作用。
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 目的：初步了解HMBA对鼻咽癌细胞CNE2的增殖抑制和诱导分化作用及可能机制，为深入开展鼻咽癌诱导分化治疗，了解天然抗肿瘤药物作用机制、筛选抗肿瘤药物提供实验依据。 思路：1.将鼻咽癌细胞CNE2分别设置对照组和实验组培养；2.实验组用不同浓度的HMBA处理，作用一定时间后对比观察CNE2细胞形态结构；3.通过MTT试验观察HMBA对CNE2细胞增殖的抑制情况。
科学性、先进性及独特之处
- 1、HMBA是一种小分子的平面极性化合物,对红白细胞血病、神经母细胞瘤、胃癌等多种肿瘤细胞具有明显的诱导分化作用,是临床上少数比较成熟的分化诱导剂之一。2、HMBA其基本特点不在于杀伤细胞而是通过诱导肿瘤细胞重新分化来达到治疗肿瘤的目的，加之分化诱导剂没有明显的细胞毒性作用，分化诱导治疗在临床应用前景方面具有特殊的优越性。3、未见有关于利用HMBA对鼻咽癌CNE2细胞进行生长抑制的文献报道
应用价值和现实意义
- 临床实践证明，鼻咽癌对一般化学抗癌药物容易产生耐药性，对病人进行大剂量放、化疗，或对产生耐药的患者再次进行化疗只能导致其生命更加垂危。诱导分化疗法是治疗恶性肿瘤的新方法，利用分化诱导剂可以使肿瘤细胞部分或全部恢复分化潜能，向正常细胞回归或引导受损细胞凋亡，从而达到治疗肿瘤的目的。本课题为研究抗癌药物提供一种科学的探索方法。为今后药物的人工合成、筛选和天然药物的开发研究提供一种有效的思路。
学术论文摘要
- 【摘要】目的 ：了解环六亚甲基二乙酰胺（HMBA）对鼻咽癌细胞CNE2生长抑制的作用。方法：采用MTT实验，分别以1 mmol/L 、3 mmol/L 、5 mmol/L、 7mmol/L、9 mmol/L HMBA在体外对鼻咽癌细胞CNE2作用24h、48h、72h、96h不同时间，检测490nm波长时相应吸光度，统计分析实验组和对照组细胞生长的差异。结果：HMBA处理的鼻咽癌细胞CNE2经过一定适应期后，倒置相差显微镜下发现细胞形态发生改变：细胞呈现长梭形，甚至呈星形，有突起，细胞数量减少。MTT实验生长曲线及抑制曲线显示，实验组细胞增殖速率显著减慢（P<0.05），HMBA最佳抑制浓度为5 mmol/L。结论：HMBA具有一定的抑制鼻咽癌细胞CNE2增殖的作用。 【关键词】鼻咽癌细胞；六亚甲基二乙酰胺（HMBA）；增殖抑制
获奖情况
- 2010年桂林医学院大学生科技竞赛一等奖
鉴定结果
- HMBA处理的鼻咽癌细胞CNE2经过一定适应期后，倒置相差显微镜下发现细胞形态发生改变：细胞呈现长梭形，甚至呈星形，有突起，细胞数量减少。MTT实验生长曲线及抑制曲线显示，实验组细胞增殖速率显著减慢。
参考文献
- MTT比色法； 环六亚甲基二乙酰胺（HMBA）诱导作用； 统计分析实验组和对照组细胞生长的差异； 倒置相差显微镜观察细胞形态； 侯菊花. 黄健. 王国华,等. HMBA在肿瘤诱导分化治疗中的研究进展. 国际遗传学杂志2009； 马宗源．李棋福．唐剑，等．HMBA对人成骨肉瘤MG263细胞增殖和相关基因表达的影响．厦门大学学报(自然科学版)；
同类课题研究水平概述
- 目前国内外的专家学者进行了诸多研究，说明HMBA对红白血病、神经母细胞瘤、胃癌等多种肿瘤细胞具有明显的诱导分化作用,是已经适用于临床的少数成熟分化诱导剂之一。Ren等的实验结果提示，HMBA对HL-60细胞的增殖抑制存在一定的时间和剂量依赖性即HMBA的分化作用随剂量增加而增强。Liu等的研究结果表明：全反式维甲酸和HMBA联合可显著抑制急性早幼粒细胞的增殖分化，这可能与下调CD44及细胞周期蛋白E和上调p27和p21的表达密切相关。董伟等人采用传统诱导分化剂三氧化二砷和HMBA分别或联合进行增殖抑制作用。其结果说明，白血病K562细胞经HMBA和(或)As2O3，作用后增殖明显受到抑制，细胞被阻滞在G1期，并有增殖协同作用。Tang等研究显示经HMBA诱导分化的肝癌细胞中，核基质一中间纤维细丝出现集中现象、且分布也趋向一致，核基质的这种向正常构型恢复的现象可能是肝癌细胞恶性表型逆转的一种重要形态特征和功能表现。李祺福等应用双向电泳显示，NPM(nucleo—phosmin又称B23、numatrin、N038，是主要的核仁磷酸化蛋白)在人肝癌SMMC-7721细胞核基质蛋白组分中表达水平较高，而在HMBA处理的细胞中其表达水平显著降低；其蛋白质印记杂交结果进一步证实了NPM在HMBA诱导后细胞核基质蛋白组分中表达明显下调；免疫荧光染色结果同样显示经HMBA处理后细胞核基质一中间纤维系统中，NPM表达明显减弱。陈兰英等人发现经HMBA处理后，人肝癌SMMC-7721细胞趋于扁平铺展状态，细胞体积增大，核质比例减小，核形状较为规则，核仁数量减少，体积变小，核内常染色质增多而异染色质减少，细胞表面微绒毛较少，边缘丝状伪足减少而片状伪足增多，表现出明显不同于对照组细胞而与正常细胞相似的形态与超微结构特征。马宗源等人对人成骨肉瘤MG-63细胞的研究结果显示：HMBA的作用与其他诱导物的作用相类似，能明显抑制细胞增殖，降低细胞增殖核抗原的表达，将细胞周期阻滞在Go／G1期，从而促使人成骨肉瘤MG-63细胞走向分化。Dey等人实验显示HMBA可诱导肺癌和乳腺癌细胞株的细胞分化及细胞凋亡。其在人类甲状腺乳头状癌的细胞系中也有明显的诱导分化作用。
