基本信息
- 项目名称：
- 血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)匀相法体外诊断试剂
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 科技发明制作A类
- 简介：
- 本项目从研究表面活性剂与不同类型脂蛋白胆固醇的相互作用机理出发，建立了清除法测定血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)方法学，最后根据建立的方法学研发相应的测定试剂，以解决目前国内在开展HDL-C检测时试剂大量依赖进口的现状。这对于提高临床实验室的检测效率、相关疾病的确诊率、实现诊断试剂的国产化，具有重要意义。
- 详细介绍：
- 血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）是一种抗高脂血症、抗冠心病和动脉粥样的体液因素。流行病学与临床研究证实，动脉粥样硬化（AS）、冠心病（CHD）的发生率与HDL-C水平呈负相关，而与低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平呈正相关。美国国家胆固醇教育计划（NCEP）成人治疗专家组（ATP）发表的第3版文件认为低HDL-C[<1.03mmol/L（40mg/dl）]是CHD的主要危险因素，而高HDL-C[≥1.55mmol/L(60mg/dl)]被认为是负危险因子，具有保护性。近年来国内外相继研制开发一些新型HDL-C的直接测定方法即匀相测定法（homogeneous methods）试剂，因其简便、快速，易于自动化，已引起关注并广泛应用于临床常规分析。 目前，国内一些临床实验室所使用的HDL-C匀相法检测试剂，多数或是从日、美等国进口的产品。本作品着眼于进口试剂国产化，运用匀相法检测人体血清HDL-C，该试剂不需要对血清样本进行预处理，即不需要将HDL-C从血清中分离出来，也不需要将HDL-C与血液的其它成分包括低密度脂蛋白LDL、极低密度脂蛋白VLDL、乳糜微粒CM等作离心沉淀分离处理，就可以直接进入分析系统进行HDL-C定量检测。该检测试剂的研发成功并国产化，对于降低老百姓就医成本，促进医患关系的和谐发展具有重要意义。
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作品专业信息
设计、发明的目的和基本思路、创新点、技术关键和主要技术指标
- 本项目从研究表面活性剂与不同类型脂蛋白胆固醇的相互作用机理出发，建立了清除法测定血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）方法学，最后根据建立的方法学研发相应的测定试剂，以解决目前国内在开展HDL-C检测时试剂大量依赖进口的现状。这对于提高临床实验室的检测效率、相关疾病的确诊率、实现诊断试剂的国产化，具有重要意义。 创新点：应用非离子型混合表面活性剂的第二代清除法技术的血清HDL-C测定方法及试剂，改变国内测定HDL-C时使用磷钨酸根及Mg2+的第一代清除技术所存在的测定结果准确性差、检测废液易堵塞生化分析仪管道的缺点。 关键技术：混合表面活性剂的选择 技术指标： 1、线性范围：0~3.90mmol/L。 2、精密度：批内精密度小于<5%，批间精密度小于<7%。 3、方法对照：用本测定试剂和日本第一化学株式会社HDL-C测定试剂测定100例血清HDL-C含量，结果显示相关系数r = 0.990。 4、方法特异性：血清胆红素<140μmol/L、TG<8.0mmol/L、血红蛋白<5.0g/L、抗坏血酸<30mg/dL时，对测定无显著影响。 5、试剂空白：测定试剂空白A≤0.050。 6、稳定性：本法测定试剂盒在37º保存可稳定7天，2-8ºC保存至少稳定一年。 7、参考范围：男性：>0.90mmol/L(>35mg/dl) 女性：>1.15mmol/L(>45mg/dl)。
科学性、先进性
- 本试剂在选用混合表面活性剂、稳定剂及显色剂体系组合方面取得了突破，一方面提高了试剂的特异性和抗干扰性，从而拓宽了试剂的检测线性范围，达到0.01-3.90mmol/L的水平；另一方面提高了试剂的稳定性，使之可以在2-8℃下稳定保存一年；同时降低了试剂成本，拓宽了试剂的临床应用范围，达到进口试剂国产化。形成相关论文2篇，1篇在《中国公共卫生》杂志上发表，另1篇别《中国卫生检验杂志》录用。已向国家专利局提出专利申请。 国内同类HDL-C检测试剂的研究水平,尚停留在采用磷钨酸根及Mg2+组合的第一代清除技术，与本技术相比，测定时存在方法特异性差、方法线性范围窄、测定试剂不稳定的缺点[1,2]，尚未达到产业化水平。 参考文献： 1. 杨昌国, 许叶, 吕邦太, 等. 高密度脂蛋白胆固醇的直接测定法. 临床检验杂志 2000，18(2) :73-75. 2. 高德路, 张世俊 李培瑛. 血清高密度脂蛋白胆固醇均相法测定试剂的研制.中华医学检验杂志 1999，22(2)：104-108.
获奖情况及鉴定结果
- 1、2009年5月以HDL-C匀相法体外诊断试剂为主导作品的普世科研团队参加温州市首届大学生创业大赛获得冠军并获3万元创新创业扶持基金，温州日报、温州都市报、温州商报给予了报道，温州电视台经济科教频道、温州晚报做了专访。） 2、2010年10月作品分别经温州市附属第二医院检验科、福鼎市医院检验科和福州市第六医院检验科临床鉴定，认为该测定试剂准确性好，灵敏度高、测定结果与临床相符，具有良好的临床应用推广价值。
作品所处阶段
- 中试阶段。
技术转让方式
- 与上海沪旦生物科技有限公司和温州市德福泰生物科技有限公司达成书面合作意向。
作品可展示的形式
- 现场演示、图片、录像、样品。
使用说明,技术特点和优势,适应范围,推广前景的技术性说明,市场分析,经济效益预测
- 技术特点：作品采用最新的表面活性剂型清除法检测原理，试剂质量达到日本第一化学HDL-C检测试剂水平，使用时特异性好，准确性高，并且无浊度干扰和堵塞自动生化分析仪管道风险，技术明显优于目前国内部分厂家推出的聚阴离子型HDL-C检测试剂。 技术优势：具有自主知识产权，试剂成本和销售价格仅为进口同类试剂销售价格的25%-40%，产品具有很高的性价比。 适用范围：体外诊断血清HDL-C含量。 推广前景：目前临床使用的HDL-C匀相法检测试剂大量依赖进口，本作品的发明可实现HDL-C诊断试剂的国产化，而其性价比又明显由于进口试剂，因此有很好的实际推广应用前景。
同类课题研究水平概述
- 高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）是血清脂蛋白中密度最大、颗粒最小的脂蛋白，其胆固醇占总胆固醇（TC）的15%～25%，在生理上起着将肝外组织的胆固醇运送到肝脏的作用，可以防止游离胆固醇在肝外组织细胞上的沉积。HDL-C参与胆固醇的逆转运，通过酶和受体的作用，将周围组织的胆固醇移肝脏降解处理，同时抑制细胞结合和摄取LDL-C，阻止胆固醇在动脉壁的沉积。 临床上测定HDL-C的方法有超速离心法、色谱法、电泳法、化学沉淀法、免疫分离法以及匀相分析法，匀相分析法和沉淀法是目前常用的两种方法，为我国临床检验操作规程（第三版）所推荐。匀相分析法无需对血清标本进行预处理，可适用于各种类型的自动生化分析仪，并具有标本使用量少，快速、简便、精密度高等优点，日益为临床实验室所采用。 由于进口试剂价格昂贵、检测成本高，国内已开展了使用聚阴离子为抑制剂的选择性抑制法方法学研究，并进行了相应的检测试剂盒研发。实验表明，以聚阴离子为抑制剂的匀相测定法虽然能对HDL-C以外的脂蛋白胆固醇如LDL-C、VLDL-C、CM等起到良好的抑制作用，但其抑制效果与反应时间非常相关，抑制时间大于5-8分钟后抑制效果明显下降，测定干扰增加；此外在测定过程中不可避免地形成由聚阴离子和非HDL-C脂蛋白组分形成的絮状复合物，此复合物易对检测过程产生干扰，导致测量结果偏低；此外，当测试完毕，检测废液被排出自动生化分析仪时，聚阴离子中存在的高浓度镁离子还有可能与分析仪管道中其他的碱性废液形成氢氧化镁沉淀而引起管道堵塞，容易对自动分析仪造成不良影响。 本作品是在浙江省科技厅新苗人才计划项目资助下完成的（表面活性剂与不同类型脂蛋白胆固醇的相互作用机理及应用研究（2007G60G209008）. 经费：0.7万. 课题负责人:朱金星.指导教师:连国军,曹建明,赵长容）。该试剂采用一组与HDL-C有选择性亲和能力的表面活性剂实现清除法测定HDL-C，产品质量和日本第一化学同类产品质量一致，具有自主知识产权，试剂成本和销售价格仅为进口同类试剂销售价格的25%-40%，产品具有很高的性价比。该项目的推广应用和产业化得到了温州市首届大学生创业大赛创业扶植基金(2009年,3.0万)和浙江省大学生科技成果推广项目（2010年, 1.0万）和的支持,项目推广应用后将会带来很好的社会效益和经济效益。
