基本信息
- 项目名称：
- 黑龙江省科技厅项目（编号：GB06B204-4）和黑龙江农垦总局项目（HNKXIV-08-05a）
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 无
- 详细介绍：
- 无
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 本试验以初生籽鹅为研究对象，选择GAPDH、ACTB、SDH、HPRT1、18S rRNA、28S rRNA、和β-tubulin共7个内参基因，通过实时定量PCR技术检测新生籽鹅五种组织中各内参基因表达水平，比较这些常用内参基因的表达稳定性，为进一步研究籽鹅组织相关基因表达奠定基础。
科学性、先进性及独特之处
- 本研究通过SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法对籽鹅组织中内参基因的选择做了系统的比较分析。
应用价值和现实意义
- 确定了新生籽鹅五种组织中常用的7个候选内参基因表达水平，最终确定了新生籽鹅组织中最佳的内参基因及其数目，为进一步研究籽鹅组织相关基因表达奠定基础。
学术论文摘要
- 分别以1日龄健康籽鹅肝脏、肾脏、心脏、肌肉和卵巢为研究对象，应用实时定量反转录PCR技术，探讨28S rRNA、18S rRNA、GAPDH和ACT、HPRT1、SDH和TUB七个内参基因mRNA的表达水平。经过geNorm和NormFinder程序分析，结果显示7个内参基因稳定度由高到低为GAPDH=HRPT1 >28S rRNA > TUB > SDH > ACT > 18S rRNA；基因表达的稳定值分别为0.215(GAPDH)、0.215(HRPT1)、0.339(28S rRNA)、0.471(TUB)、0.721(SDH)、0.888(ACT)、1.177(18S rRNA)，结果表明GAPDH和HRPT1两个内参基因适合用于目的基因表达的校正。
获奖情况
- 无
鉴定结果
- 无
参考文献
- [4] Vandesompele J，De Preter K，Pattyn F，et al．Accurate normalization of real-time quantitative RT-PCR data by geometric averaging of multipleinternal control genes[J]．Genome Biology，2002，3(7)：1~11． [5] Claus L A，Jens L J，Torben F O．Normalization of real-time quantitative reverse transcription-PCR data：A model-based variance estimation approach to identify genes suited for normalization，applied to bladder and colon data sets[J]．Cancer Research，2004，64：5245~5250． [6] Infante C，Matsuoka M P，Asensio E，et al．Selection of house-keeping genes for gene expression studies in larvae from flatfish using real-time PCR[J]．BMC Mol Biol，2008(9)：28． [8] Suzuki T，Higgins P J，Crawford D R．Control selection for RNA quantitation[J]．Biotechniques，2000，29(2)：332~337．
同类课题研究水平概述
- 目前关于内参基因选择方面的研究尚不全面，且籽鹅组织中内参的选择尚未见报道。
