自甘草、甘草残渣(提取过甘草酸)中提取、分离和纯化甘草酸及甘草黄酮类成分,筛选最佳提取方法,并比较普通提取与复合酶提取法对甘草酸及甘草黄酮含量的影响。研究包括:1、筛选大孔树脂型号,选出分离提纯效果较好的树脂型号。2、采用不同洗脱液浓度洗脱,分析洗脱效果,确定最佳浓度洗脱液。3、建立甘草酸及建立甘草黄酮的检测方法。4、比较复合酶法和醇提法的提取效果。
目的:自甘草、甘草残渣(提取过甘草酸)中提取、分离和纯化甘草酸及甘草黄酮类成分,筛选最佳提取方法,并比较普通提取与复合酶提取法对甘草酸及甘草黄酮含量的影响。方法:1)用乙醇(10%),氨水(10%)和复合酶(果胶酶、纤维素酶)提取甘草酸,采用大孔吸附树脂D-101进行分离、提纯,洗脱液选用10%、90%乙醇,得到不同成分的甘草酸。采用高效液相色谱法测定甘草酸最终含量; 2)分别以30%,50%,95%的乙醇用乙醇提取法和加纤维素酶、果胶酶的复合酶法提取甘草残渣中的甘草黄酮。采用AB-8大孔吸附树脂分离、提纯,用水,30%,50%,95%乙醇洗脱,得到不同组分的黄酮类物质。采用薄层层析法鉴别甘草黄酮,紫外分光光度法检测甘草黄酮含量,利用聚乙酰胺进一步纯化黄酮。3)取300公斤甘草以最佳方法用于工业化中试。结果:1.结果表明在相同实验条件下,复合酶提取法对甘草酸及甘草黄酮的提取量高于普通醇,氨水提取法比烯醇提取法效果好,甘草酸10%乙醇洗脱的效果最好;甘草黄酮95%乙醇加酶提取效果最好。工业化中试结果表明甘草酸纯度达90%以上。结论:采用复合酶预处理、氨水提取,D-101树脂吸附,10%乙醇作为洗脱液,甘草酸含量最高;用复合酶预处理、95%乙醇提取甘草渣,用聚乙酰胺对甘草黄酮进行洗脱,甘草黄酮得率最高。意义:本实验研究提供的提取方法成本低,能耗低;复合酶预处理对环境安全;适宜工业化生产。
第十二届“挑战杯”省赛作品 省赛三等奖
1.复合酶法提取甘草酸已经申请 中国专利(见附件)
2.专利:本研究申报专利一项,与工厂签订生产合同1项(见附件)
3.于2011年,荣获本校“启明星”第四届大学生课外学术科技作品竞赛一等奖。(见附件奖状)